Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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beziehungsweise fehlenden σ B -Aktivität, zeigten in TSB Medium eine gegenüber dem
Wildtyp stark verminderte Biofilmbildung. Im Gegensatz dazu zeigten Mutanten mit Inaktivierung
des Anti-Sigmafaktors RsbW bei intaktem sigB Gen (1457rsbW und
1457rsbUVW) in TSB Medium eine im Vergleich zum Wildtyp gesteigerte
Biofilmbildung (Abbildung 3.9). Durch Supplementierung des TSB Mediums mit 4%
NaCl konnte die Biofilmproduktion sowohl des Wildtyp Stammes, als auch der
Mutanten mit inaktiviertem RsbW induziert werden. Im Gegensatz dazu ließen sich
Mutanten mit verminderter σ B -Aktivität nicht durch Zugabe von NaCl zur Biofilmbildung
induzieren. Bemerkenswerterweise ließen sich der Wildtyp, sowie alle untersuchten
Mutanten unabhängig von der jeweiligen Deletion, durch Zugabe von Ethanol
in das Nährmedium zur Biofilmbildung stimulieren.
Abbildung 3.9
Biofilmbildung von S. epidermidis 1457 und den primär generierten Deletionsmutanten.
Die Biofilmbildung wurde in 96-Loch-Zellkulturplatten mit Nuclon Delta Oberfläche
untersucht. Es wurden folgende Nährmedien verwendet: TSB, TSB NaCl 4% , TSB EtOH 2%
und TSB EtOH 4% . Nach Anfärbung mit Gentianaviolett wurde die Absorption bei 570 nm
gemessen (A 570 ). Es sind jeweils Ergebnisse repräsentativer Experimente dargestellt.
Um auszuschließen, dass die beobachteten Unterschiede der Biofilmexpression auf
unterschiedliche Wachstumsraten der Mutanten zurückzuführen sind, wurden die jeweils
erreichten Zellzahlen verglichen. (Abbildung 3.10). In den getesteten Nährmedien
konnten bezüglich der Höhe der erreichten KBE, keine signifikanten Unterschiede
zwischen den Mutanten und dem Wildtypstamm S. epidermidis 1457 festgestellt
werden.