Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...
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2 Material <strong>und</strong> Methoden 24<br />
2.1.5 Antibiotika<br />
Zur Selektion wurden die Medien mit unterschiedlichen Antibiotika in verschiedenen<br />
Konzentrationen supplementiert. Sämtliche Antibiotika wurden bei Sigma (Taufkirchen,<br />
Deutschland) bezogen.<br />
Tabelle 2.2 Verwendete Antibiotika-Stammlösungen<br />
Antibiotikum Stammlösung<br />
Ampicillin: 100 mg/ml in 80 % (v/v) Ethanol, Aliquots gelagert bei –20 °C<br />
Chloramphenicol: 10 mg/ml in 95 % (v/v) Ethanol, Aliquots gelagert bei 4 °C<br />
Erythromycin: 50 mg/ml in 95 % (v/v) Ethanol, Aliquots gelagert bei 4 °C<br />
Oxacillin: 10-200 mg/ml in 95 % (v/v) Ethanol, Aliquots gelagert bei–20 °C<br />
2.1.6 Enzyme<br />
Enzym<br />
RNase (DNase frei)<br />
T4-DNA-Ligase<br />
BamHI<br />
EcoRI<br />
HindIII<br />
KpnI<br />
NheI<br />
SacI<br />
DNase (RNase frei)<br />
Lysostaphin<br />
Proteinase K<br />
Shrimp alkaline Phosphatase (SAP)<br />
Tabelle 2.3 Verwendete Enzyme<br />
Hersteller<br />
Boehringer, Mannheim, Deutschland<br />
Pharmacia, Freiburg, Deutschland<br />
Promega, Madison, WI, USA<br />
Sigma, Taufkirchen, Deutschland<br />
USB Corporation, Cleveland, OH, USA<br />
2.1.7 Bezugsquellen für verwendete Reagenziensets<br />
Tabelle 2.4 Verwendete Reagenziensets<br />
Bezeichnung<br />
Hersteller<br />
λ Phagen DNA -HindIII /<br />
Finnzymes, Espoo, Finnland<br />
øX174 Phagen DNA -HaeIII Verdau<br />
ABI PRISM dGTP BigDye Terminator Applied Biosystems, Foster City, CA, USA<br />
Ready-Reaction Kit<br />
Anti-Digoxigenin-AP Fab Fragment Roche, Mannheim, Deutschland<br />
Anti-Kaninchen-IgG-FITC-Konjugat Sigma, Taufkirchen, Deutschland<br />
CDP-Star<br />
Roche, Mannheim, Deutschland<br />
DIG Wash and Blockbufferset Roche, Mannheim, Deutschland<br />
DIG-Easy Hyb granules<br />
Roche, Mannheim, Deutschland