Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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punkten 3,4- beziehungsweise 2,2-fach vermindert (Abbildung 3.21). In der Mutante
1057rsbUVW wurde icaA während der exponentiellen Phase leicht vermindert und in
der stationären Phase geringfügig verstärkt transkribiert. In der stationären Phase wurde
außerdem eine leicht verringerte icaR Transkription detektiert. Diese Unterschiede sind
möglicherweise in einer konstitutiven sigB Expression dieser Mutanten begründet,
wohingegen das σ B Operon in den Wildtypstämmen einer Autoregulation unterliegt.
Somit konnte belegt werden, dass die σ B -abhängige Regulation der Biofilmbildung über
eine Regulation der icaADBC Transkription durch den negativen Regulator IcaR
vermittelt wird. Da σ B als Transkriptionsfaktor nur einen aktivierenden Einfluss ausüben
kann, muss die Regulation von IcaR folglich über ein weiteres, bisher unbekanntes
Intermediat erfolgen. Die von den Arbeitsgruppen Kies et al. 137 und Mack et al. 175 demonstrierte
Rekonstitution der Biofilmbildung durch Expression des icaADBC Operons
in trans in Mutanten mit Inaktivierung von sigB, ist somit am ehesten auf eine Überexpression
von icaADBC zurückzuführen, da die verwendeten Plasmide nicht das Gen für
den negativen Regulator IcaR enthielten.
Aufgrund des differentiellen Phänotyps der Mutante M15 hatten Knobloch et al. die
Vermutung postuliert, dass die Ethanol Induktion der Biofilmbildung möglicherweise
über eine RsbU unabhängige σ B -Aktivierung erfolgt, wie sie in B. subtilis beobachtet
wird 148 . Da jedoch auch die Mutanten mit Deletion des sigB Gens einen vergleichbaren
Phänotyp aufwiesen, konnte diese These widerlegt werden (Abbildung 3.9, 3.11, 3.13,
3.14, 3.17 bis 3.20). Als direkte Zielstruktur einer therapeutischen Intervention im
Rahmen Fremdkörper-assoziierter Infektionen erscheint der alternative Sigmafaktor σ B
somit nicht geeignet, da die aufgezeigte σ B -unabhängige Aktivierung der Biofilmbildung
einen solchen Therapieansatz umgehen könnte.
Conlon et al. konnten zeigen, dass Ethanol in der Lage ist, die Transkription von icaR
zu reprimieren 44 . Daher wurde diese Eigenschaft in den Deletionsmutanten weiter untersucht.
Wie bereits ausgeführt wurde, konnte in den Mutanten 1457rsbU, 1457sigB und
1457rsbUVWsigB, eine im Vergleich zum Wildtyp deutlich verstärkte icaR Transkription
bei gleichzeitiger Repression von icaA dokumentiert werden. Supplementierung des
Mediums mit Ethanol führte analog zu der rekonstituierten Biofilmbildung zu einer
Repression von icaR, sowie einer konsekutiv gesteigerten Transkription von icaA
(Abbildung 3.23). Somit kann neben der bereits gezeigten σ B -abhängigen Repression
von IcaR, eine σ B -unabhägige Repression von IcaR durch Ethanol postuliert werden.