Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

3 Ergebnisse 73
Exemplarisch für Mutanten mit verminderter σ B -Aktivität wurden die ΔrsbUVWsigB
Mutanten untersucht, während beispielhaft für Mutanten mit Inaktivierung von RsbW
bei intaktem sigB Gen die ΔrsbUVW Mutanten verwendet wurden.
Abbildung 3.22 Transkriptionsanalyse von sarA in den Mutanten 1457rsbUVWsigB, 1457rsbUVW,
8400rsbUVWsigB, 8400rsbUVW sowie 1057rsbUVWsigB, 1057rsbUVW mittels quantitativer
real time-PCR. Die RNA wurde in drei unabhängigen Experimenten während
der exponentiellen (A), beziehungsweise stationären Wachstumsphase (B) isoliert.
Relative Transkriptionsunterschiede wurden jeweils im dreifach Ansatz im Vergleich
zum jeweiligen Wildtypstamm mit Hilfe der 2 -ΔΔC T Methode berechnet. Gezeigt sind die
Mittelwerte aus drei Experimenten mit dem jeweiligen Standardfehler, aufgetragen auf
einer logarithmischen Skala. Mutanten mit Deletion des gesamten σ B Operons sind in
schwarz, Mutanten mit Inaktivierung der regulativen Kaskade rsbUVW in grau
dargestellt. Gestrichelte Linien markieren den 2,5-fachen Unterschied als Grenzwert für
eine signifikante Veränderung.
Eine Analyse der Transkriptionsaktivität von sarA zeigte eine signifikante Veränderung
lediglich für die Mutanten 8400rsbUVWsigB und 8400rsbUVW in Form einer 5,8-
fachen, beziehungsweise 3,7-fachen Reduktion in der exponentiellen Wachstumsphase.
In der stationären Wachstumsphase boten diese Mutanten, ebenso wie alle anderen
untersuchten Mutanten keine signifikante Veränderung der sarA Transkription.