Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

3 Ergebnisse 56
Abbildung 3.7
Transkriptionsanalyse mittels Northern Blot von S. epidermidis 1457 zu den Zeitpunkten
4h, 7h, 10h und 24h. Es ist außerdem die genetische Organisation des asp23
und des sarA Gens in S. epidermidis mit den publizierten Promotoren gezeigt (gene
bank accession no.: AE016750 und AF054173). (A) Hybridisierung mit einer asp23-
spezifischen Sonde. Es wurden zwei Transkripte mit circa 0,6 kb und 1,5 kb detektiert.
Die Größe entsprach einem Transkriptionsstart von den σ B -abhängigen Promotoren P B1
und P B2 . Die höchste Transkriptionsaktivität wurde nach 7h detektiert. (B)
Hybridisierung mit einer sarA-spezifischen Sonde. Es konnten drei Transkripte dokumentiert
werden. Das kleinste entsprach einem Transkriptionsstart von dem erwiesenermaßen
σ B -abhängigen Promotor P B1 . Die Größe der beiden anderen Transkripte
entsprach einem Transkriptionsstart von den σ A -abhängigen Promotoren P A2 .und P A3 .
Die höchste Transkriptionsaktivität wurde auch hier nach 7h gemessen. Gerade Pfeile
A
B
markieren offene Leserahmen. P A und P B
B repräsentieren σ - beziehungsweise σ -abhängige
Promotoren Es sind jeweils Ergebnisse repräsentativer Experimente dargestellt.
Durch Hybridisierung mit einer asp23-spezifischen Sonde konnten im Wildtyp S. epidermidis
1457 und in den Mutanten 1457rsbW und 1457rsbUVW zwei Transkripte
detektiert werden. Die Transkriptgröße entsprach mit circa 1,5 und 0,6 kb der zu erwartenden
Größe bei einem Transkriptionsstart von den Promotoren P 1 und P 2 (Abbildung
3.8 A). Ein Translationsbeginn von dem P 3 Promotor konnte jedoch nicht mit absoluter
Sicherheit ausgeschlossen werden, da in S. epidermidis der P 2 und der P 3 Promotor
lediglich 88 bp voneinander entfernt liegen. In den Mutanten 1457rsbV, 1457sigB und
1457rsbUVWsigB konnte mit der asp23-spezifischen Sonde kein Hybridisierungssignal
detektiert werden. Lediglich in vereinzelten Experimenten konnte durch sehr lange Belichtungszeiten
eine schwache σ B -abhängige Transkription in der Mutante 1457rsbU
detektiert werden (Daten nicht gezeigt). Mit einer sarA-spezifischen Sonde konnten im
Wildtyp S. epidermidis 1457 und in den Mutanten 1457rsbW und 1457rsbUVW drei
Transkripte nachgewiesen werden (Abbildung 3.8 B), deren Größe den publizierten