Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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dis 1457 generierten Deletionsmutationen außerdem in den unabhängigen, Oxacillinresistenten
genetischen Hintergrund von S. epidermidis 1057 transduziert und hinsichtlich
ihrer Biofilmbildung charakterisiert (Abbildung 3.18). Der Expressionsphänotyp
der Mutanten (1057rsbU, 1057rsbV, 1057rsbW, 1057sigB, 1057rsbUVW sowie
1057rsbUVWsigB) entsprach dem bereits in S. epidermidis 1457 und 8400 mit den
jeweiligen Mutanten beobachteten, σ B -abhängigen Verhalten unter den untersuchten
Umweltbedingungen.
Abbildung 3.18 Biofilmbildung von S. epidermidis 1057 mit den entsprechenden Deletionsmutanten.
Die Biofilmbildung wurde in 96-Loch-Zellkulturplatten mit Nuclon Delta Oberfläche
untersucht. Es wurden folgende Nährmedien verwendet: TSB, TSB NaCl 4% , TSB EtOH 2%
und TSB EtOH 4% . Nach Anfärbung mit Gentianaviolett wurde die Absorption bei 570 nm
gemessen (A 570 ). Es sind jeweils Ergebnisse repräsentativer Experimente dargestellt.
Ob die beobachteten σ B -abhängigen Unterschiede der Biofilmexpression auf einer
differentiellen PIA Synthese beruhen, wurde zunächst mittels Immunfloureszenztest mit
173, 178
Hilfe eines spezifischen Anti-PIA-Antikörpers untersucht.
Exemplarisch für
Mutanten mit verminderter σ B -Aktivität sind hier die Mutanten 8400rsbUVWsigB und
1057rsbUVWsigB gezeigt, während beispielhaft für Mutanten mit Inaktivierung von
RsbW bei intaktem sigB Gen die Mutanten 8400rsbUVW und 1057rsbUVW aufgeführt
sind (Abbildung 3.19 und Abbildung 3.20).