Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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1457 generierten Deletionsmutationen in den unabhängigen, Oxacillin-sensiblen genetischen
Hintergrund von S. epidermidis 8400 transduziert. Die sich ergebenden
Mutanten (8400rsbU, 8400rsbV, 8400rsbW, 8400sigB, 8400rsbUVW sowie
8400rsbUVWsigB) wurden unter den zuvor aufgeführten Kulturbedingungen hinsichtlich
ihrer Biofilmbildung analysiert (Abbildung 3.17). In TSB Medium zeigten
Mutanten mit fehlender, beziehungsweise stark verminderter σ B -Aktivität, eine stark
verminderte Biofilmbildung, welche sich auch nicht durch Zugabe von 4 % NaCl induzieren
ließ. Im Gegensatz dazu zeigten Mutanten mit einer Deletion des rsbW Gens bei
intaktem sigB Gen, eine im Vergleich zum Wildtypstamm gesteigerte Biofilmbildung in
TSB Medium. In diesen Mutanten konnte, wie auch im Wildtypstamm, die Biofilmbildung
durch Zugabe von 4 % NaCl noch weiter gesteigert werden. Supplementierung
mit Ethanol führte in allen Stämmen unabhängig von der vorliegenden Deletion zur
Induktion der Biofilmbildung. Dieses Expressionsmuster der Biofilmbildung von S. epidermidis
8400 und den zugehörigen Mutanten entsprach dem in S. epidermidis 1457
und den jeweiligen Mutanten beobachteten σ B -abhängigen Expressionsverhalten.
Abbildung 3.17 Biofilmbildung von S. epidermidis 8400 mit den entsprechenden Deletionsmutanten.
Die Biofilmbildung wurde in 96-Loch-Zellkulturplatten mit Nuclon Delta Oberfläche
untersucht. Es wurden folgende Nährmedien verwendet: TSB, TSB NaCl 4% , TSB EtOH 2%
und TSB EtOH 4% . Nach Anfärbung mit Gentianaviolett wurde die Absorption bei 570 nm
gemessen (A 570 ). Es sind jeweils Ergebnisse repräsentativer Experimente dargestellt.
Da es sich bei S. epidermidis Isolaten aus Fremdkörper-assoziierten Infektionen
typischerweise um Oxacillin-resistente Stämme handelt 83, 221 , wurden die in S. epidermi-