Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

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Für die Mutante 1057rsbUVWsigB wurde lediglich in der exponentiellen Wachstumsphase
eine signifikant erhöhte (3,4-fache) icaR Transkriptionsaktivität detektiert,
während in der stationären Phase nur eine 2,3-fach erhöhte Transkriptionsaktivität
gemessen wurde. In der Mutante 8400rsbUVWsigB wurde ebenfalls lediglich eine 1,9-
sowie 2,3-fach erhöhte icaR Transkriptionsaktivität in der exponentiellen, beziehungsweise
stationären Wachstumsphase detektiert. Jedoch wurde in keiner der 18 durchgeführten
Transkriptionsanalysen eine Verminderung der icaR Transkriptionsaktivität
beobachtet, so dass eine leicht gesteigerte icaR Transkription als eine kennzeichnende
Eigenschaft der Mutanten mit Inaktivierung von σ B bestätigt werden konnte (Abbildung
3.21 A-D).
Mutanten mit Inaktivierung der regulativen Kaskade rsbUVW wiesen in einzelnen Isolaten
unterschiedliche Transkriptionsprofile auf. Während in der Mutante 1457rsbUVW
nur in der exponentiellen Phase eine gesteigerte icaA Transkriptionsaktivität beobachtet
wurde und die Regulation von icaR zu keinem Zeitpunkt signifikante Unterschiede im
Vergleich zum Wildtyp aufwies (Abbildung 3.16), wurde für die Mutante 8400rsbUVW
analog zu der stark gesteigerten Biofilmbildung, eine gegenüber dem Wildtypstamm
signifikant verstärkte icaA Transkription detektiert (in der exponentiellen Phase 5,5-
fach, in der stationären Phase 19-fach). Die Transkriptionsaktivität von icaR war zu
diesen Zeitpunkten 3,4- beziehungsweise 2,2-fach vermindert. In der Mutante
1057rsbUVW wurde icaA während der exponentiellen Phase leicht vermindert (3,9-
fach) und in der stationären Phase geringfügig verstärkt (3,1-fach) transkribiert. Eine
signifikante Regulation von icaR wurde für 1057rsbUVW nur in der stationären Phase
in Form einer leicht verminderten (2,9-fach) Transkription detektiert (Abbildung 3.21).
3.2.5 Evaluation der sarA Transkription in den Deletionsmutanten
In S. aureus konnte SarA als zentraler Regulator der Biofilmsynthese identifiziert
werden 259 . Die Arbeitsgruppe von Conlon et al. hatte auch in S. epidermidis einen positiven
regulativen Einfluss des sarA Gens auf die icaADBC Transkription nachweisen
können 46 . Interessanterweise wird sarA auch in S. epidermidis von einem σ B -abhängigen
und zwei σ A -abhängigen Promotoren transkribiert (Abbildung 3.7 B) 80 . Es
wurde daher zusätzlich die sarA Transkription der Deletionsmutanten in der der exponentiellen
(7h) sowie der stationären (17h) Wachstumsphase mittels real time PCR
untersucht und mit den jeweiligen Wildtyp Stämmen verglichen (Abbildung 3.22).