Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...

3 Ergebnisse 57
Transkriptgrößen von 640, 760 und 850 bp entsprach 80 . In den Mutanten 1457rsbV,
1457sigB und 1457rsbUVWsigB konnte mit der sarA-spezifischen Sonde kein Transkript
von dem erwiesenermaßen σ B -abhängigen Promotor P 1 detektiert werden,
während die beiden σ A -abhängigen Transkripte des sarA Gens von den Promotoren P 2
und P 3 weiterhin detektiert werden konnten. Wiederum konnten durch lange
Belichtungszeiten in einzelnen Experimenten für die Mutante 1457rsbU eine schwache
σ B -Aktivität nachgewiesen werden (Daten nicht gezeigt).
Abbildung 3.8
Einfluss der Deletionen auf die Transkription der σ B -abhängigen Gene asp23 und sarA.
Die dargestellten Northern Blots zeigen Hybridisierungen mit einer asp23-spezifischen
(A) und einer sarA-spezifischen (B) Sonde. In den Mutanten 1457rsbU, 1457rsbV,
1457sigB und 1457rsbUVWsigB ließen sich keine σ B -abhängigen Transkripte
detektieren. Es sind jeweils Ergebnisse repräsentativer Experimente dargestellt.
Somit konnte asp23 als geeignetes Gen zur Beurteilung der σ B -Aktivität in real time
PCR Experimenten identifiziert werden, da es im Gegensatz zu sarA ausschließlich σ B -
abhängig transkribiert wird.
3.2 Regulation der Biofilmbildung durch σ B
3.2.1 Biofilmbildung der Mutanten des σ B Operons in S. epidermidis 1457
Um den Einfluss der generierten Deletionen des σ B Operons auf die Biofilmbildung zu
untersuchen, wurden semiquantitative Biofilmtests in 96-Loch-Zellkulturplatten mit
einer Nuclon Delta Oberfläche durchgeführt. Die Mutanten 1457rsbU, 1457rsbV,
1457sigB und 1457rsbUVWsigB, also jene Mutanten mit einer stark verminderten,