Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...
Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...
Regulationsmechanismen von Oxacillinresistenz und Biofilmbildung ...
Sie wollen auch ein ePaper? Erhöhen Sie die Reichweite Ihrer Titel.
YUMPU macht aus Druck-PDFs automatisch weboptimierte ePaper, die Google liebt.
3 Ergebnisse 60<br />
3.2.2 Evaluation der PIA Synthese der Deletionsmutanten mittels IFT<br />
Das interzelluläre Polysaccharidadhäsin PIA vermittelt die Zell zu Zell Adhäsion<br />
innerhalb des Biofilms <strong>von</strong> S. epidermidis 171-173, 178 . Um zu überprüfen, ob die beobachteten<br />
σ B -abhängigen Unterschiede der <strong>Biofilmbildung</strong> auf eine differentielle PIA<br />
Synthese zurückzuführen sind, wurde ein Immunfluoreszenztest mit Hilfe eines<br />
spezifischen Anti-PIA-Antikörpers 173, 178 <strong>und</strong> eines fluoreszenzmarkierten Zweitantikörpers<br />
durchgeführt. Der Wildtypstamm S. epidermidis 1457 bildete unter statischen<br />
Kulturbedingungen in TSB Medium große Zellhaufen. Mit Hilfe des Anti-PIA-Antikörpers<br />
konnte nachgewiesen werden, dass die Zellen innerhalb des Polysaccharids eingebettet<br />
sind. Dieses Verhalten des Wildtyps konnte ebenfalls bei Anzucht in TSB NaCl 4%<br />
beobachtet werden, wobei die im semiquantitativen Biofilmassay gezeigte Induktion der<br />
<strong>Biofilmbildung</strong> mit dieser Methode nicht mit Sicherheit detektiert werden konnte.<br />
Mutanten mit Inaktivierung <strong>von</strong> RsbW bei intaktem sigB Gen bildeten in TSB <strong>und</strong> in<br />
TSB NaCl 4% große, PIA-positive Zellkonglomerate. Im Gegensatz dazu bildeten Mutanten<br />
mit fehlender, beziehungsweise stark verminderter σ B -Aktivität weder in TSB noch<br />
in TSB NaCl 4% signifikante Zellkonglomerate. Mit Hilfe des Anti-PIA-Antikörpers<br />
konnte bei diesen Mutanten kein PIA an den einzeln liegenden Zellen nachgewiesen<br />
werden. Interessanterweise bildeten alle Mutanten sowie der Wildtypstamm in<br />
TSB EtOH 3% , große PIA-positive Zellhaufen (Abbildung 3.12 <strong>und</strong> 3.13 <strong>und</strong> 3.14).<br />
Abbildung 3.12 <strong>Biofilmbildung</strong> <strong>von</strong> S. epidermidis 1457rsbU. Es wurden folgende Nährmedien verwendet:<br />
TSB, TSB NaCl 4% <strong>und</strong> TSB EtOH 3% . Die Zellen wurden mit SYTO61 rot dargestellt.<br />
PIA wurde mit Hilfe eines spezifischen Anti-PIA-Antikörpers <strong>und</strong> eines fluoreszenzmarkierten<br />
Zweitantikörpers grün dargestellt. 1457rsbU bildete weder in TSB<br />
noch in TSB NaCl 4% signifikante Zellkonglomerate (1, 2 ,4, 5). In TSB EtOH 3% wurden<br />
große, PIA-positive Zellhaufen gebildet (3, 6). Es sind jeweils Ergebnisse repräsentativer<br />
Experimente dargestellt.
Change language