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3.5. Isolierung von 2,5-Diketogluconat als Hemicalciumsalz
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Über die Isolierung und Aufreinigung von 2,5-DKG ist in der Literatur bisher wenig
bekannt. Isolierungsversuche führen oft zu signifikanten Verlusten von 30 oder sogar
80% [Sonoyama et al. 1982, Stroshane et al. 1977]. Vor allem bei höheren
Temperaturen und in alkalischer Lösung zersetzt sich die Substanz schnell [Bloemsma
et al. 1963]: Bereits ab einem pH-Wert von größer 4,5 werde die Verbindung instabil.
Die von Blake et al. vorgeschlagene säulenchromatographische Aufreinigungsmethode
über ein Kationenaustauscherharz war nicht reproduzierbar [Blake et al. 1984]. Auch
die Chromatographie über einen starken Anionentauscher, die Udo Kragl zur
Aufarbeitung von N-Acetylneuraminsäure entwickelt hatte [Kragl 1992], blieb ohne
Erfolg.
Die in dieser Arbeit entwickelte Methode führte zur Isolierung des 2,5-DKG als
Hemicalciumsalz Ca(2,5-DKG) 2 . Dafür wurde Calciumcarbonat zu einer essigsauren,
2,5-DKG-haltigen Lösung gegeben; durch Zugabe von Aceton wurde das 2,5-DKG-
Calciumsalz ausgefällt.
Abbildung 3.41 zeigt die aufgereinigte, weiße Substanz.
Abbildung 3.41: Isoliertes 2,5-Diketogluconat als Hemicalciumsalz Ca(2,5-DKG) 2
Die mit Hilfe der HPLC-Analytik ermittelte Reinheit betrug 54%. Auch durch Lösen
und erneutes Fällen konnte die Reinheit nicht weiter gesteigert werden. Abbildung 3.42
zeigt das HPLC-Chromatogramm nach erneuter Fällung.
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