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8.14. Kontinuierliche Biotransformationen
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Über einen Füllstandgrenzschalter (3) (FTW 420, Endress+Hauser) wurde die
abziehende Produktpumpe reguliert und der Füllstand im Reaktorraum konstant
gehalten. Als Messfühler dienten zwei Edelstahldrähte, zwischen denen eine
Wechselspannung anlag.
Abbildung 8.6: Anlagenaufbau zur kontinuierlichen Produktion von 2,5-DKG. 1: Reaktorraum; 2:
Membranmodul; 3: Füllstandsregler
Die Verweilzeit wurde über die Zulaufrate variiert. Zur Unterdrückung der Schaumbildung
wurde die Glucoselösung mit Antischaummittel Biospumex 153k (Cognis) in
einer Konzentration von 50 μL/L versetzt.
8.14.2 Isolierte Enzyme
Die kontinuierliche Produktion von 2-KLG aus 2,5-DKG fand im Enzymmembranreaktor
statt (3 oder 10 mL, Eigenbau Forschungszentrum Jülich). Den genauen Aufbau
zeigt Abbildung 8.7.
Für den Enzymrückhalt sorgte eine YC500 bzw. YM3-Membran (Millipore) mit einem
Cutoff von 0,5 bzw. 3 kDa. Der Enzymmembranreaktor wurde kontinuierlich gerührt
und mittels eines Kryostaten (DC3, Haake) auf 20°C gehalten. Substratlösung,
bestehend aus 2,5-DKG, Puffersubstanzen und NADP + , wurde in einem 250 mL-
Doppelwandkolben vorgelegt und auf 4°C gekühlt. Die Lösung wurde mit einer
Kolbenpräzisionspumpe (P-500, Amersham Biosciences) durch eine Blasenfalle und
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