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View - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

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5.3. Kontinuierliche Produktion von 2-Keto-L-Gulonat aus Glucose<br />

______________________________________________________________________<br />

Die gekoppelte Anlage lief stabil über mehr als 8 Tage und produzierte durchschnittlich<br />

etwa 20-22 mM 2-KLG (Abbildung 5.8). Die Gesamtausbeute schwankte zwischen 50<br />

und 75 %, durchschnittlich betrug sie 63%.<br />

Konzentration am Auslauf c 3<br />

/ mM<br />

Ausbeute Reaktor 1 Ausbeute Reaktor 2<br />

Gesamtausbeute Kaskade c 3<br />

2-KLG<br />

50<br />

45<br />

40<br />

35<br />

30<br />

25<br />

20<br />

15<br />

+ 10 mg 2,5-DKGR<br />

10<br />

+ 9,1 mg 2,5-DKGR<br />

+ 1 g G. oxydans<br />

5<br />

+ 51 mg Lb-ADH<br />

0<br />

0 1 2 3 4 5 6 7 8<br />

Laufzeit / d<br />

100<br />

90<br />

80<br />

70<br />

60<br />

50<br />

40<br />

30<br />

20<br />

10<br />

0<br />

Ausbeute / %<br />

Abbildung 5.8: Kontinuierliche Produktion von 2-KLG aus Glucose. Reduktion von 2,5-DKG<br />

findet in zwei 10 mL-Enzymmembranreaktoren statt. Bedingungen: Oxidation von Glucose zu 2,5-<br />

DKG: V = 50 mL, 25°C, 50 mmol/L Glucose, 50 mmol/L KP i -Puffer, pH-Titration auf pH 5 mit 1N<br />

KOH, = 2 h, 20-40 g BFG G.oxydans NCIMB 8084, Umwälzung 67 L /h. Reduktion von 2,5-DKG zu<br />

2-KLG: V = 2*10 mL, 20°C, pH 6,4, 0,1 mM NADP, 1 M Isopropanol, Verdünnung 2,5-DKG: 61,5<br />

%, = 0,33 h, EMR1: 2,8 mg/mL 2,5-DKGR, 5,43 mg/mL Lb-ADH, EMR2: 0,5-2,4 mg/mL 2,5-<br />

DKGR, 4,8-9,9 mg/mL Lb-ADH.<br />

Die Anlage erreichte Raumzeitausbeuten von maximal 216 mmol*L -1 *d -1 . Es wurde<br />

eine total turnover number von 75.270 für das Enzym 2,5-DKGR erreicht. Alle für die<br />

Prozesscharakterisierung relevanten Werte und Ergebnisse sind in Tabelle 5.8<br />

zusammengefasst.<br />

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