termoestabilidad de sustancias antimicrobianas en la leche - RiuNet

Material y Métodos
- Viales de vidrio de 2 y 4 mL con sus respectivos tapones y septums
- Microinsertos o microviales de 300 µL
Además se empleó el material habitual del laboratorio (guantes de látex, pesa
sustancias, probetas, matraces aforados, erlenmeyers, espátulas, pipetas de vidrio,
etc.).
2.4. REACTIVOS
2.4.1. Fase móvil del sistema cromatográfico “cleanup”
Para el sistema cromatográfico “cleanup” se preparó una fase móvil compuesta
por dos reactivos, repartidos en dos bombas diferentes de la siguiente manera:
- Bomba A: Acetonitrilo grado gradiente
- Bomba B: Fosfato potásico monobásico (KH2PO4) 0,01M
Los reactivos necesarios para la preparación de esta fase móvil fueron:
- Acetonitrilo grado gradiente para cromatografía líquida.
- Fosfato potásico monobásico (KH2PO4)
- Agua ultra pura grado reactivo
La preparación de KH2PO4 se llevó a cabo en un vaso de precipitados de 250
mL donde se pesaron 2,7 ± 0,1 g de KH2PO4 y se disolvieron con agua ultra pura
hasta 2 L. La disolución obtenida se filtró y se desgasificó posteriormente en el baño
de ultrasonidos durante quince minutos.
2.4.2. Fase móvil del sistema cromatográfico de análisis con detector UV
Este sistema de separación cromatográfica se utilizó, como se ha
mencionado anteriormente, para la cuantificación de las penicilinas así como para la
separación cuantitativa de las tetraciclinas.
Para el análisis de las penicilinas, se utilizó una fase móvil compuesta por una
mezcla de reactivos en una única bomba (Bomba A). Estos reactivos necesarios para
la preparación de la fase móvil fueron los siguientes:
- Acetonitrilo grado isocrático
- Dodecil sulfato sódico SDS 0,0075 M
- Acido fosfórico (H3PO4) 0,015 M
- Agua ultra pura grado reactivo
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