termoestabilidad de sustancias antimicrobianas en la leche - RiuNet

Introducción
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La metodología empleada en las técnicas LC-MS para la purificación del analito
de la muestra de leche se realiza de una forma sencilla, en una o dos etapas
consistentes en una extracción mediante la adición de reactivos y un “cleanup” SPE. Sin
embargo en el estudio realizado por Carson et al. (1998), la extracción del analito fue
más complicada ya que requirió de varias etapas “Cleanup”, una MCAC (columnas de
afinidad metálica) y otra SPE antes del análsis cromatográfico.
Los límites de detección obtenidos por los diferentes autores fueron adecuados en
todos los casos, siempre con valores inferiores al LMR establecido por la UE para las
tetraciclinas (100 µg/kg). También, los porcentajes de recuperación indicados
presentaron valores acordes con el intervalo (70-110%) recomendado por la legislación.
3.3.3. Sulfonamidas
En cuanto a los sistemas cromatográficos empleados para la determinación de
sulfonamidas en la leche, se han publicado en los últimos años algunos trabajos que
combinan la cromatografía líquida con detectores convencionales y espectroscopia de
masas.
En los estudios que se presentan en el Cuadro 12 se observa la diversidad de
métodos analíticos que existen para la determinación de sulfonamidas en la leche,
destacando aquellos que emplean detección ultravioleta UV y PDA (Furusawa y Kishida,
2001; Pérez et al., 2002; Kishida y Furusawa, 2004; Yang et al., 2004; De Zayas-Blanco
et al., 2004; When et al., 2005).
Estos métodos necesitan de una fase previa de preparación de la muestra para
eliminar las interferencias de la matriz en el posterior análisis cromatográfico, empleando
diferentes extracciones con reactivos, “cleanup” SPE o MSPD y ultrafiltración.
Por lo general, las características de funcionamiento de estos métodos
presentaron buenos valores de detección (por debajo de los LMR de la UE) y elevados
porcentajes de recuperación, excepto en el trabajo presentado por When et al. (2005),
donde se indica una recuperación para uno de los analitos en estudio del 45%.
Algunos autores utilizan la detección por fluorescencia para la detección de
sulfonamidas (Viñas et al., 1996; Eder et al., 1997) empleando una derivatización pre o
post-columna mediante la adición de reactivos (OPA, ME o fluorescamina) a la muestra
purificada para formar moléculas fluorescentes y detectables con gran sensibilidad y
selectividad.