termoestabilidad de sustancias antimicrobianas en la leche - RiuNet
termoestabilidad de sustancias antimicrobianas en la leche - RiuNet
termoestabilidad de sustancias antimicrobianas en la leche - RiuNet
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
Introducción<br />
Reci<strong>en</strong>tem<strong>en</strong>te se han introducido <strong>la</strong>s nuevas columnas RAM-BSA (Restricted<br />
Access Medium Bovine Serum Albumin) acop<strong>la</strong>das a <strong>la</strong> cromatografía líquida para <strong>la</strong><br />
<strong>de</strong>tección <strong>de</strong> residuos <strong>de</strong> antibióticos beta<strong>la</strong>ctámicos <strong>en</strong> <strong>la</strong> <strong>leche</strong> (Oliveira y Cass, 2006;<br />
Oliveira et al., 2007). Estas columnas se acop<strong>la</strong>n “<strong>en</strong> línea” al sistema cromatográfico y<br />
reti<strong>en</strong><strong>en</strong> <strong>en</strong> su interior <strong>la</strong> fase proteica y otras macromolécu<strong>la</strong>s pres<strong>en</strong>tes <strong>en</strong> <strong>la</strong> matriz.<br />
Estos métodos han sido empleados para <strong>la</strong> <strong>de</strong>terminación <strong>de</strong> cefalosporinas<br />
mostrando bu<strong>en</strong>os límites <strong>de</strong> <strong>de</strong>tección por <strong>de</strong>bajo <strong>de</strong> los LMR <strong>de</strong> los analitos y<br />
porc<strong>en</strong>tajes <strong>de</strong> recuperación muy elevados (90,7-104%).<br />
Todas <strong>la</strong>s técnicas repres<strong>en</strong>tadas <strong>en</strong> el Cuadro 8 son a<strong>de</strong>cuadas para <strong>la</strong><br />
<strong>de</strong>tección <strong>de</strong> algunas <strong>sustancias</strong> beta<strong>la</strong>ctámicas, <strong>en</strong> especial para <strong>la</strong>s p<strong>en</strong>icilinas. Sin<br />
embargo, estos métodos no son una herrami<strong>en</strong>ta fiable para <strong>la</strong> confirmación inequívoca<br />
<strong>de</strong> compuestos, por lo que <strong>en</strong> los últimos años se han <strong>de</strong>sarrol<strong>la</strong>do numerosos métodos<br />
LC acop<strong>la</strong>dos a espectrómetros <strong>de</strong> masas.<br />
Estos <strong>de</strong>tectores mejoran <strong>en</strong> algunos casos <strong>la</strong> s<strong>en</strong>sibilidad y selectividad <strong>de</strong> <strong>la</strong><br />
<strong>de</strong>tección y permit<strong>en</strong> <strong>la</strong> i<strong>de</strong>ntificación <strong>de</strong> un mayor número <strong>de</strong> compuestos o antibióticos<br />
beta<strong>la</strong>ctámicos <strong>en</strong> <strong>la</strong> <strong>leche</strong>. El Cuadro 9 resume los principales trabajos realizados por<br />
difer<strong>en</strong>tes autores don<strong>de</strong> se emplean este tipo <strong>de</strong> <strong>de</strong>tectores.<br />
A partir <strong>de</strong> los datos pres<strong>en</strong>tados <strong>en</strong> el Cuadro 9 se pue<strong>de</strong> <strong>de</strong>ducir que <strong>la</strong>s<br />
técnicas cromatográficas acop<strong>la</strong>das a <strong>de</strong>tectores <strong>de</strong> masas repres<strong>en</strong>tan una herrami<strong>en</strong>ta<br />
s<strong>en</strong>sible y muy selectiva para <strong>la</strong> i<strong>de</strong>ntificación y cuantificación <strong>de</strong> residuos <strong>de</strong> antibióticos<br />
beta<strong>la</strong>ctámicos <strong>en</strong> <strong>la</strong> <strong>leche</strong>, sin necesidad <strong>de</strong> realizar numerosos pasos previos <strong>de</strong><br />
purificación <strong>de</strong> <strong>la</strong> muestra.<br />
La mayoría <strong>de</strong> <strong>la</strong>s técnicas <strong>de</strong>scritas emplean una extracción simple <strong>de</strong>l analito<br />
mediante <strong>la</strong> adición <strong>de</strong> reactivos y una segunda etapa <strong>de</strong> extracción <strong>en</strong> fase sólida (SPE)<br />
para realizar <strong>la</strong> <strong>de</strong>sproteinización <strong>de</strong> <strong>la</strong> muestra y eliminar <strong>la</strong>s interfer<strong>en</strong>cias <strong>de</strong> <strong>la</strong> matriz,<br />
excepto el trabajo realizado por Makeswara et al. (2005), sobre <strong>la</strong> <strong>de</strong>tección <strong>de</strong>l ceftiofur,<br />
que incluye <strong>en</strong> el procesami<strong>en</strong>to <strong>de</strong> <strong>la</strong> muestra, varias etapas sucesivas, incluy<strong>en</strong>do<br />
c<strong>en</strong>trifugación, SPE, <strong>de</strong>rivatización y SPE <strong>de</strong> intercambio catiónico.<br />
Por otra parte, los límites <strong>de</strong> <strong>de</strong>tección obt<strong>en</strong>idos por los distintos autores<br />
permit<strong>en</strong> cuantificar los residuos <strong>de</strong> antibióticos beta<strong>la</strong>ctámicos a conc<strong>en</strong>traciones bajas<br />
siempre por <strong>de</strong>bajo <strong>de</strong> los LMRs establecidos por <strong>la</strong> legis<strong>la</strong>ción. Los porc<strong>en</strong>tajes <strong>de</strong><br />
recuperación también son a<strong>de</strong>cuados con valores <strong>de</strong>ntro <strong>de</strong>l intervalo (70-110%)<br />
recom<strong>en</strong>dado por <strong>la</strong> Decisión 2002/657/CEE, excepto <strong>en</strong> dos <strong>de</strong> los estudios (Daeseleire<br />
et al., 2000; Ghidini et al., 2003), que pres<strong>en</strong>tan recuperaciones más bajas <strong>en</strong>tre el 57-<br />
88% y 28-82% respectivam<strong>en</strong>te.<br />
43