termoestabilidad de sustancias antimicrobianas en la leche - RiuNet
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Introducción<br />
<strong>en</strong> <strong>la</strong> actualidad, don<strong>de</strong> <strong>de</strong>stacan el método SNAP ® , Delvo-X-Press ® βL, Twins<strong>en</strong>sor,<br />
Beta Star ® y ROSA ® Charm, <strong>en</strong>tre otros.<br />
32<br />
En cuanto a los métodos utilizados <strong>en</strong> <strong>la</strong> fase <strong>de</strong> confirmación y cuantificación, se<br />
emplean métodos físico-químicos que se utilizan para i<strong>de</strong>ntificar y cuantificar <strong>de</strong> una<br />
forma inequívoca <strong>la</strong> pres<strong>en</strong>cia <strong>de</strong> residuos <strong>de</strong> antimicrobianos <strong>en</strong> <strong>la</strong>s muestras <strong>de</strong> <strong>leche</strong>.<br />
Se han <strong>de</strong>sarrol<strong>la</strong>do numerosas metodologías que se <strong>en</strong>cu<strong>en</strong>tran disponibles<br />
para <strong>la</strong> <strong>de</strong>tección cuantitativa <strong>de</strong> diversos grupos <strong>de</strong> antimicrobianos. Sin embargo, estos<br />
métodos son caros y muy <strong>la</strong>boriosos, y también requier<strong>en</strong> haber analizado mediante<br />
instrum<strong>en</strong>tación muy precisa un amplio rango <strong>de</strong> controles positivos a diversas<br />
conc<strong>en</strong>traciones conocidas para po<strong>de</strong>r extrapo<strong>la</strong>r mediante curvas patrón <strong>la</strong><br />
conc<strong>en</strong>tración <strong>de</strong> <strong>la</strong> muestra problema.<br />
Las técnicas cromatográficas son <strong>la</strong>s que se emplean con mayor frecu<strong>en</strong>cia.<br />
Exist<strong>en</strong> varios tipos <strong>de</strong> métodos, como <strong>la</strong> cromatografía <strong>de</strong> gases (GC), <strong>la</strong> cromatografía<br />
<strong>de</strong> capa fina (TLC), <strong>la</strong> cromatografía <strong>de</strong> capa fina/bioautografía (TLC/BA) o <strong>la</strong><br />
cromatografía líquida (HPLC).<br />
En <strong>la</strong> actualidad, <strong>la</strong>s técnicas cromatográficas son <strong>la</strong>s que se emplean con mayor<br />
frecu<strong>en</strong>cia para <strong>la</strong> i<strong>de</strong>ntificación y cuantificación <strong>de</strong> residuos <strong>de</strong> antimicrobianos <strong>en</strong> <strong>la</strong><br />
<strong>leche</strong>, especialm<strong>en</strong>te <strong>la</strong> cromatografía líquida <strong>de</strong> alta resolución (HPLC) <strong>de</strong>l inglés High<br />
Performance Liquid Chromatography, <strong>de</strong>nominada actualm<strong>en</strong>te <strong>de</strong> una forma más simple<br />
como cromatografía líquida (LC) también <strong>de</strong>l inglés Liquid Chromatography.<br />
3. DETECCIÓN DE ANTIMICROBIANOS EN LA LECHE POR HPLC<br />
3.1. GENERALIDADES<br />
La cromatografía líquida <strong>de</strong> alta resolución (HPLC o LC) es una técnica que se<br />
utiliza para separar compuestos <strong>de</strong> una mezc<strong>la</strong> o muestra <strong>en</strong> <strong>la</strong>s difer<strong>en</strong>tes <strong>sustancias</strong><br />
individuales que <strong>la</strong> compon<strong>en</strong>. Esta separación <strong>de</strong> compuestos ocurre cuando <strong>la</strong> muestra<br />
se introduce <strong>en</strong> una fase móvil líquida que atraviesa, con una presión elevada, una fase<br />
estacionaria, sólida y fija, <strong>de</strong>nominada columna cromatográfica.<br />
La fase móvil y <strong>la</strong> columna <strong>de</strong> un sistema cromatográfico se elig<strong>en</strong> <strong>de</strong> forma que<br />
los distintos compon<strong>en</strong>tes <strong>de</strong> <strong>la</strong> muestra pres<strong>en</strong>t<strong>en</strong> difer<strong>en</strong>tes solubilida<strong>de</strong>s o<br />
interacciones para cada una <strong>de</strong> el<strong>la</strong>s.<br />
La columna conti<strong>en</strong>e un <strong>de</strong>terminado material cromatográfico empacado que sirve<br />
para realizar <strong>la</strong> separación <strong>de</strong> los compuestos pres<strong>en</strong>tes <strong>en</strong> <strong>la</strong> mezc<strong>la</strong> inicial a su paso<br />
por esta. De esta forma, un compuesto totalm<strong>en</strong>te soluble <strong>en</strong> <strong>la</strong> columna tardará más