INFECCIONES POR OOMYCETES EN POBLACIONES DE ... - Gredos

Infecciones por Oomycetes en poblaciones de anfibios de la Sierra de Gredos (Ávila)
método para seleccionar las concentraciones experimentales ha sido descrito en
el capítulo 1. En el caso de B. calamita este procedimiento se utilizó para
determinar la concentración más alta y la baja se estableció en un orden de
magnitud menor.
Para llevar a cabo la adición de zoosporas en los tanques
experimentales se utilizó una solución stock de concentración conocida. Antes
de la adición de la solución, se sacó cuidadosamente de los contenedores
experimentales un volumen de agua igual al volumen de solución stock que
sería incorporado para obtener la concentración de zoosporas deseada. Este
procedimiento también se siguió para los controles, con la diferencia de que en
este caso en lugar de solución de zoosporas se añadió agua mineral.
Los contenedores fueron revisados diariamente durante el periodo de
72 horas posterior a la adición de zoosporas en cada caso, anotándose el
número de embriones muertos. Este periodo de 72 horas se seleccionó por dos
razones; en primer lugar, para que no hubiera un solapamiento entre las fases
del desarrollo analizadas en cada uno de los grupos, y en segundo lugar,
porque, con base a observaciones previas, se estimó que los individuos del
tercer grupo comenzarían a nadar a partir de las 72 horas post-exposición, lo
que en condiciones naturales podría influir significativamente en el riesgo de
contraer una infección por Saprolegnia. Los embriones muertos fueron
analizados para detectar la presencia de Saprolegnia. En el caso de observarse
crecimiento de micelio, se llevaron a cabo aislamientos del mismo para
identificar la especie de Saprolegnia mediante técnicas moleculares, y
comprobar que se trataba de la misma que se había usado en los experimentos.
Se calcularon las tasas de mortalidad tras 24, 48 y 72 horas de
exposición a los patógenos. Estas tasas de mortalidad se transformaron
mediante el arcoseno de la raíz cuadrada antes de llevar a cabo los análisis
estadísticos. Para analizar el efecto de las zoosporas en la supervivencia de los
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