INFECCIONES POR OOMYCETES EN POBLACIONES DE ... - Gredos

Aislamiento, identificación y virulencia de las especies de Saprolegnia
carácter patógeno de las cepas pertenecientes al género Saprolegnia sobre
los huevos de las especies de anfibios de las que se aislaron, estando
implicadas, quizás, en episodios de mortalidad de estos huevos.
1.2 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
DE SAPROLEGNIALES
1.2.1 Materiales y Métodos
Toma de muestras y aislamiento de Saprolegniales
Para llevar a cabo los aislamientos se recolectaron huevos con síntomas de
infección por Saprolegniales de puestas de sapo de espuelas (Pelobates
cultripes), sapo común (Bufo bufo), B. calamita, ranita de San Antonio (Hyla
arborea) y rana verde común (Pelophylax perezi) (ver tabla 1 en página 63).
Los síntomas de la infección son fácilmente reconocibles ya que el
crecimiento del micelio alrededor del huevo le confiere un aspecto algodonoso
(Fig. 1.1). Los huevos infectados se lavaron con una solución de 100 mg/l de
penicilina C en agua destilada. Una vez lavados, se tomó un fragmento del
huevo y se colocó en el interior de un anillo de cristal estéril de 3 cm de
diámetro colocado sobre una placa de peptona glucosa agar (PG1). Para evitar
el crecimiento de bacterias, se añadió penicilina C al agar en una concentración
de 100 mg/l. Los aislamientos se mantuvieron en PG1 + penicilina C y se
encuentran almacenados en la colección de cultivos del Real Jardín Botánico
(Madrid).
Así mismo, se recogieron muestras de agua en los puntos de
reproducción de anfibios. En cada una de estas muestras se introdujo una
semilla de cañamón previamente autoclavada. Al cabo de unos días, cuando el
crecimiento del micelio sobre la semilla fue detectable, se extrajo la semilla del
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