INFECCIONES POR OOMYCETES EN POBLACIONES DE ... - Gredos

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Infecciones por Oomycetes en poblaciones de anfibios de la Sierra de <strong>Gredos</strong> (Ávila) 4.2 MATERIALES Y MÉTODOS Para llevar a cabo este estudio se recolectaron huevos recién depositados de H. arborea y P. perezi (
Influencia del exceso de nitrógeno en el efecto de la infección por Saprolegnia utilizándose dicho método en todos los casos para determinar la concentración más alta, mientras que la baja se estableció en un orden de magnitud menor. En el experimento de H. arborea, la concentración alta de zoosporas de S. diclina fue de 20.000 zoosporas/ml y la baja de 2000 zoosporas/ml, mientras que la concentración alta de Saprolegnia sp. fue de 4286 zoosporas/ml y la baja de 429 zoosporas/ml. En el experimento de P. perezi, las concentraciones fueron similares para ambas cepas, estableciéndose la alta en 1388 zoosporas/ml y la baja en 139 zoosporas/ml. La producción de zoosporas se llevó a cabo según la metodología descrita por Diéguez-Uribeondo et al. (1994) y resumida en el capítulo 1. Las concentraciones experimentales de nitrato se establecieron en 22,6 mg N-NO 3 -/l para P. perezi y 11,3 mg N-NO 3 -/l para H. arborea. El hecho de emplear concentraciones diferentes en cada ensayo se fundamenta en la diferente sensibilidad mostrada por cada especie a la exposición a nitrógeno inorgánico según se describe en la literatura científica, y tal como se ha mencionado con anterioridad. La concentración utilizada para H. arborea corresponde al máximo de nitrato permitido para el agua potable (EU, 1998), mientras que la concentración de P. perezi constituye un nivel habitual en charcas que reciben el agua de escorrentía procedente de los campos de cultivo (p.ej. Scholefield et al., 1996). Las concentraciones experimentales de nitrato se obtuvieron añadiendo al agua el volumen correspondiente de una solución stock de concentración conocida, preparada a partir de la disolución de sal de nitrato sódico 99% pura. Cada tratamiento (nivel de zoosporas x nivel de nitrato) se replicó tres veces. El experimento comenzó cuando todos los embriones estaban en estadío 12 según Gosner (1960) y se prolongaron hasta que la totalidad de los supervivientes habían eclosionado y eran capaces de nadar. La duración de los ensayos fue de 7 días en el caso de H. arborea y 18 días en el caso de P. perezi. 141
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EL DECLIVE DE LOS ANFIBIOS Durante
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