TUBERCULOSE Manuel pour les Etudiants en ... - Tuberculosis
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chirurgica<strong>les</strong>), sont contaminés par d’autres bactéries. Pour détruire ces bactéries<br />
qui peuv<strong>en</strong>t contaminer le milieu de culture, il est nécessaire de décontaminer le<br />
prélèvem<strong>en</strong>t avec des antiseptiques basiques qui tu<strong>en</strong>t <strong>les</strong> bactéries contaminantes<br />
beaucoup plus vite que <strong>les</strong> mycobactéries. Cette décontamination permet aussi<br />
d’homogénéiser le produit pathologique.<br />
C<strong>en</strong>trifugation et neutralisation<br />
Les produits pathologiques sont <strong>en</strong>suite c<strong>en</strong>trifugés, le liquide surnageant éliminé<br />
et le culot est ram<strong>en</strong>é à pH neutre par un acide faible.<br />
Ensem<strong>en</strong>cem<strong>en</strong>t<br />
Le culot de c<strong>en</strong>trifugation est <strong>en</strong>sem<strong>en</strong>cé dans au moins deux tubes cont<strong>en</strong>ant un<br />
milieu de culture spécifique, généralem<strong>en</strong>t le milieu de Loew<strong>en</strong>stein-J<strong>en</strong>s<strong>en</strong><br />
(milieu solide <strong>en</strong>richi à l’œuf).<br />
Dans le cas de lésions fermées (ou lors d’interv<strong>en</strong>tions chirurgica<strong>les</strong>), le<br />
prélèvem<strong>en</strong>t doit se faire avec la plus grande asepsie et être <strong>en</strong>sem<strong>en</strong>cé<br />
directem<strong>en</strong>t sur le milieu de culture sans décontamination.<br />
Mise à l’étuve<br />
Les tubes <strong>en</strong>sem<strong>en</strong>cés sont placés dans une étuve à 37°C p<strong>en</strong>dant 4 à 12 semaines,<br />
<strong>les</strong> mycobactéries tuberculeuses poussant très l<strong>en</strong>tem<strong>en</strong>t (temps de doublem<strong>en</strong>t<br />
moy<strong>en</strong> de 13 à 20 heures) donneront des colonies visib<strong>les</strong> à l’œil nu après au<br />
moins 3 semaines d’incubation.<br />
• Lecture<br />
Lorsqu’une culture a poussé, on voit à l’œil nu à la surface du milieu de culture de<br />
grosses colonies <strong>en</strong> « choux fleur », arrondies, de couleur crème-beige, à surface<br />
sèche et rugueuse, bi<strong>en</strong> individualisées ou <strong>en</strong> nappes selon la richesse du<br />
prélèvem<strong>en</strong>t <strong>en</strong> bacil<strong>les</strong> (Annexe 4).<br />
• Id<strong>en</strong>tification<br />
<strong>TUBERCULOSE</strong> MANUEL POUR LES ETUDIANTS EN MEDECINE<br />
CHAPITRE I<br />
Lorsque <strong>les</strong> colonies apparaiss<strong>en</strong>t, el<strong>les</strong> doiv<strong>en</strong>t être id<strong>en</strong>tifiées par des critères<br />
selon leur aspect macroscopique (colonies rugueuses) et par leur réponse à des<br />
tests biochimiques : <strong>les</strong> colonies de M. tuberculosis ont une activité catalasique<br />
thermolabile (positive à 22°C, détruite par la chaleur à 68°C), une activité nitrate<br />
réductase, et el<strong>les</strong> accumul<strong>en</strong>t l’acide nicotinique ou niacine qui peut être révélé<br />
par le niacine-test. Dans <strong>les</strong> autres cas il s’agit d’une autre mycobactérie qu’il<br />
faudra id<strong>en</strong>tifier (M. bovis, BCG ou mycobactéries atypiques).<br />
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