Régulation des populations de Nématodes gastro-intestinaux ...

Procédures expérimentales
évidence d’antigènes qui seraient détruits par une fixation préalable des échantillons, ce qui
est le cas pour les marqueurs membranaires qui nous intéressaient : CD4+ et CD8+.
Les anticorps primaires utilisés dans ces deux cas sont :
- un anticorps spécifique des lymphocytes T CD4+ : mouse anti-ovine CD4,
MCA2213 (SEROTEC), dilution 1/2000 ème ,
- un anticorps spécifique des lymphocytes T CD8+ : mouse anti-bovine CD8,
MCA837G (SEROTEC), dilution 1/800 ème .
Là encore, la réactivité de ces anticorps dans l’espèce ovine est connue et précisée par le
fabricant.
Figure n°17 : Coupe histologique de caillette d’ovin infesté par H. contortus mettant en
évidence des lymphocytes CD4+ (marquage immunohistochimique sur coupe en congélation,
anticorps anti-CD4, grossissement 1000).
7. ETUDE DE LA LYMPHOPROLIFERATION SPECIFIQUE D’ANTIGENES PARASITAIRES
7.1. Principe
Nous avons choisi d’évaluer l’intensité de la réponse immunitaire par un test de
transformation lymphoblastique in vitro, ou lymphoprolifération. Cette technique permet de
déterminer la proportion de lymphocytes T spécifiques d’un antigène, capables de réagir à ce
dernier par une expansion clonale. Elle est applicable aux lymphocytes sanguins, mais
également aux lymphocytes tissulaires et, en particulier, ceux des structures ganglionnaires.
L’antigène parasitaire est processé par des cellules présentatrices d’antigènes et présenté aux
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