Régulation des populations de Nématodes gastro-intestinaux ...

4.3. Isolement des cellules CD4 positives du nœud lymphatique abomasal pour
extraction spécifique des ARN de cette fraction cellulaire.............................................91
4.4. De l’ARN à l’ADN complémentaire (ADNc)… .......................................................92
4.5. PCR quantitative....................................................................................................92
5. EXPLORATION DE LA REPONSE HUMORALE GENERALE GENERALE ET LOCALE............94
5.1. Collecte des prélèvements ......................................................................................94
5.2. Préparation des antigènes......................................................................................94
5.3. Détermination des conditions optimales pour l’ELISA ...........................................95
5.4. Technique ELISA ...................................................................................................98
6. ETUDE DE LA REPONSE CELLULAIRE LOCALE ..............................................................98
6.1. Histologie conventionnelle et immunohistochimie sur coupes en paraffine .............99
6.1.1. Collecte des prélèvements ...............................................................................99
6.1.2. Technique histologique ...................................................................................99
6.1.3. Colorations à l’Hémalun/Eosine et au Giemsa .................................................99
6.1.4. Immunohistochimie sur coupes en paraffine..................................................101
6.2. Immunohistochimie sur coupes en congélation.....................................................102
6.2.1. Collecte et technique des prélèvements..........................................................102
6.2.2. Immunohistochimie.......................................................................................102
7. ETUDE DE LA LYMPHOPROLIFERATION SPECIFIQUE D’ANTIGENES PARASITAIRES.....103
7.1. Principe ...............................................................................................................103
7.2. Technique ............................................................................................................104
7.2.1. Préparation des cellules .................................................................................104
7.2.2. Mise en culture et stimulation des cellules mononucléées..............................104
7.3. Interprétation des résultats ..................................................................................105
8. ANALYSES STATISTIQUES ...........................................................................................105
CHAPITRE V : RESULTATS.........................................................................................107
PARTIE I : ETUDE DE LA REPONSE IMMUNITAIRE ADAPTATIVE CHEZ DES
AGNEAUX DE RACE SENSIBLE, INRA 401, INFESTES PAR H. CONTORTUS OU T.
COLUBRIFORMIS...........................................................................................................108
ARTICLE I :HAEMONCHUS CONTORTUS (NEMATODA : TRICHOSTRONGYLIDAE) INFECTION
IN LAMBS ELICITS AN UNEQUIVOCAL TH2 IMMUNE RESPONSE........................................111
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