Régulation des populations de Nématodes gastro-intestinaux ...

Procédures expérimentales
d’une densité supérieure à celle de la plupart des œufs de parasites (d=1,19), permet la
remontée des éléments parasitaires, donc leur flottation, tout en laissant couler les débris
fécaux. Un échantillon du surnageant ainsi obtenu permet de remplir les deux cellules de la
lame de McMaster (environ 0.5 mL par cellule). Dans chaque cellule se trouve un réseau
quadrillé correspondant à un volume de 0.15 mL.
Le comptage des œufs est réalisé dans l’ensemble du réseau. Le nombre d’œufs par gramme
(OPG) est alors donné par la formule :
OPG = (nombre d’œufs/volume total du réseau)*(volume de NaCl + poids des fécès) / poids
des fécès
De façon plus simple, chaque cellule de la lame de McMaster a un volume connu de 0,15 mL
donc, comme la solution est diluée au 1/15 ème , le nombre d’œufs comptés est celui contenu
dans un centième de gramme de fèces. Pour obtenir le nombre d’œufs par gramme, on
multiplie le résultat obtenu lors du comptage sur une cellule par 100 (on conseille toutefois de
compter les deux cellules ; le facteur de multiplication est alors de 50), soit :
OPG = Nombre d’œufs dans les deux cellules de la lame de McMaster x 50
2.2. Mise en culture in vitro des œufs de Haemonchus contortus
Le développement des œufs en larves infestantes L3 correspond à la phase libre du cycle
parasitaire des Trichostrongles. Cette étape revêt une importance particulière puisque son
échec peut mettre en péril l’ensemble du cycle parasitaire. Nous nous sommes intéressés à la
capacité des œufs récoltés dans les matières fécales à se transformer en L3 afin de vérifier que
des œufs issus d’ovins résistants (comme les Barbados Black Belly) ont ou non la même
capacité à évoluer en L3 que des œufs excrétés par des animaux de race sensible.
Les matières fécales prélevées sur les ovins sont pesées et le nombre d’œufs par gramme
qu’elles contiennent est évalué. Elles sont alors placées à 23°C pendant une dizaine de jours,
période au cours de laquelle elles sont régulièrement humidifiées. Au bout de 10 jours, les
larves L3 ainsi obtenues sont récoltées par la méthode de Baermann sur une nuit. Le comptage
des larves récoltées permet ainsi de calculer le pourcentage d’œufs présents au départ qui ont
évolué en larve L3.
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