Acta 93.indd - Výzkumný ústav Silva Taroucy pro krajinu a okrasné ...

Tab. 1 Rozsah sbírek a možnosti využití in vitro genobanky jiřinek proměnlivých, petúnií Surfinia a chryzantémzahradních v roce 2009Druh Počet klonů Využití genobanky Interval subkultivace(počet měsíců)Jiřinka proměnlivá 94 udržování, ozdravování, odvozenísadbového materiálu, mikropropagacenových šlechtitelských materiálů8–9Petúnie 31 udržování, odvození skleníkové10–12matečniceChryzantéma zahradní 79 udržování 10–12Pro založení skleníkové matečnice (kolem 30 klonů) bylav zimním období (XII., II.) provedena 2× subkultivace klonůz dlouhodobě udržované sbírky in vitro na čerstvé MS médiumbez růstových regulátorů (obr. 1). Teplota byla zvýšenana 22 °C. Takto namnožený materiál byl opět subkultivovándo větších kultivačních nádob (Duchefa, 900 ml) na kultivačnímédium stejného složení. Od každého klonu se odebralo25–30 výhonů. Během 4–5 týdnů došlo k prodlouženía zakořenění výhonů. Poté (květen) byly rostlinky převedenya aklimatizovány ve skleníku (obr. 2).V případě, že byl do kultivačního média přidán cytokininbenzyladenin (0,5 mg.l -1 ), docházelo sice ke zvýšení počtu výhonů,ale výhony byly krátké a nebyly vhodné pro zakořeňování.Vzhledem k tomu, že petúnie patří mezi rostliny fakultativnědlouhodenní (Votruba, 1999), bylo nezbytné kulturypěstovat při 8 hod fotoperiodě, aby nedocházelo k tvorběkvětních výhonů.Chryzantéma zahradní – sbírka in vitro je subkultivovánakaždých 10–12 měsíců na čerstvé MS médium bez růstovýchregulátorů, ve stejných světelných a teplotních podmínkáchjako ostatní druhy.Při zakládání genobanky vybraných druhů květin jsme serozhodli použít techniku omezeného růstu, vzhledem k vybavenílaboratoře a zkušenostem s in vitro kulturami. Rozsaha využití genobanky in vitro vycházelo z požadavků pracovníkůOddělení genových zdrojů VÚKOZ, v.v.i. (tab. 1).Pro střednědobé uchování vzorků v in vitro podmínkách bylapoužita teplota 10 °C, která se osvědčila při konzervaci genovýchzdrojů brambor (Horáčková a Domkářová, 2003).Pro minimalizaci výskytu somaklonální variability byly kulturyin vitro zakládány a dále udržovány z organizovaného pletiva(terminální a axilární pupeny). Kultivace probíhala na živnémmédiu bez růstových regulátorů nebo s nízkou koncentracícytokininu.Obr. 1 Multiplikace rostlinného materiálu pro založení skleníkovématečnice u petúniíObr. 2 Mladé rostlinky petúnií odvozené z in vitro kultury29