vá et al. (1998) použili <strong>pro</strong> repatriaci aklimatizované 20 měsícůstaré semenáče Dactylorhiza maculata subsp. maculata přímoz in vitro podmínek s 12% úspěšností.Cílem práce bylo vypracovat metodu ex situ kultivace u ohroženéhodruhu vemeníku dvoulistého – Platanthera bifolia (L.)L. C. Richard v asymbiotických podmínkách bez přítomnostihoubového symbionta. Tento vstavač je s příbuzným druhemvemeníkem zelenavým, Platanthera chlorantha (Custer) Reichenb.,jediným ohroženým zástupcem rodu Platanthera rostoucímv Čechách a na Moravě.MATERIÁL A METODARostlinný materiálV experimentech byla použita zralá semena P. bifolia z lokality(mírně se svažující západní svah řídce zalesněný listnatýmistromy) u Netolic v jižních Čechách. Sledovaný druhpatří mezi ohrožené rostliny, v „Černém a červeném seznamucévnatých rostlin“ je zařazen do kategorie C3 (Procházkaet al., 2001). Jedná se o druh chráněný dle vyhlášky MŽP395/1992 Sb.Povrchová sterilizace semenSemena byla sterilizována 70% etanolem po dobu 3 mina 7,2% roztokem hypochloridu vápenatého po dobu 40 mindo odbarvení semen a poté byla 3× <strong>pro</strong>pláchnuta ve sterilnídestilované vodě a rozetřena mikrobiologickou kličkou nazešikmený agar do zkumavek. Semena klíčila ve tmě v termostatupři teplotě 20 2 °C.Živná médiaVe výsevních a kultivačních médiích byla koncentrace základníchmakro- a mikroelementů, vitaminů, aktivního uhlí, kaseinhydrolyzátu, kvasničného extraktu upravena podle Vejsadové(2006). Média byla autoklávována po dobu 20 min přiteplotě 120 °C. Po 20 týdnech byly <strong>pro</strong>tokormy přenesenyz výsevních médií na kultivační, které obsahovaly auxiny a cytokininyv uvedených koncentracích (tab. 1).Přenos semenáčů do ex vitro podmínekZískané semenáče byly po 13 měsících přeneseny z kultivačníchmédií do nesterilních podmínek. Před vysazením byly invitro kultury aklimatizovány po dobu 10 dnů při teplotě 10 2 °C. Poté byly kořeny důkladně <strong>pro</strong>myty v destilované voděa zbaveny zbytků média a rostliny byly umístěny do plastovýchminipařenišť o velikosti 45 × 20 cm. Byly převedeny buďdo čistého perlitu nebo směsi perlit : vápenitý jíl : hrabankaz původní lokality v poměru 1:1:1. Po třech měsících byl zjišťovánvliv složení substrátů na počet rostoucích semenáčů vyjádřenýv % a délku nadzemních částí.Kultivační podmínkyIn vitro semenáče byly kultivovány v růstové místnosti při termoperiodě23/19 °C a převedené ex vitro rostliny při teplotěden/noc 20/18 °C. Fotoperioda světlo/tma byla vždy 16/8 ha intenzita světla měla hodnotu 60 μE m –2 s –1 .Statistické vyhodnoceníU 8 měsíců starých in vitro semenáčů byl zjišťován počet listů,kořenů i hlíz a délka nadzemní části a kořene. Výsledky bylystatisticky zpracovány na základě jednocestné analýzy ANOVAa srovnávacího Duncanova testu na hladině významnosti p =0.05. Každá varianta obsahovala 30/40 opakování (rostlin).VÝSLEDKY A DISKUSEVliv koncentrace NAA a cytokininů na růstové parametryin vitro semenáčůPo 8 měsících byl růst semenáčů vyjádřený průměrnou délkounadzemní části a kořene i počtem listů a kořenů statistickyvýznamně stimulován přítomností 1,16 μM kinetinu přivyšší koncentraci NAA v médiu (5,37 μM), tab. 2. U této variantybyla také průkazně indukována tvorba hlíz, důležitá <strong>pro</strong>další vegetativní množení. Při nižší dávce NAA se pozitivníúčinek kinetinu ne<strong>pro</strong>jevil v žádném ze sledovaných parametrů.Zeatin průkazně podpořil tvorbu listů a růst kořene bezzávislosti na koncentraci NAA a TDZ stimuloval počet listůa kořenů při nižší koncentraci testovaného auxinu. Kombina-Tab. 1 Koncentrace auxinů a cytokininů v kultivačním médiuVarianty Růstový regulátor Koncentrace (μM)Auxiny NAA 1 2,69NAA 2 5,37IAA 1 2,85IAA 2 5,71Cytokininy kinetin 1,16BA 1,112iP 1,23TDZ 1,14zeatin 0,72NAA (kys. 1-naftyloctová), IAA (kys. 1-indolyloctová), kinetin (6 – furfurylaminopurin), BA (benzyladenin), 2iP(isopentenyladenin), TDZ (thidiazuron), zeatin (hydroxymetyltranbutenylaminopurin).32
Tab. 2 Vliv koncentrace NAA a cytokininů na růstové parametry 8 měsíců starých semenáčů P. bifoliaVarianty Počet Délkalistů kořenů hlíz nadz. část (mm) kořen (mm)NAA 1 1,27 a 1,36 a 1,10 a 1,25 a 1,95 aNAA 2 1,12 a 1,48 a 1,31 a 1,12 a 2,00 aNAA 1 + kinetin 1,43 a 1,71 a 1,43 a 0,94 a 2,19 aNAA 2 + kinetin 2,00 b 3,25 c 2,50 b 1,85 b 2,88 bNAA 1 + BA 1,67 a 1,50 a 1,33 a 1,17 a 2,42 aNAA 2 + BA 1,00 a 1,40 a 1,40 a 1,14 a 2,44 aNAA 1 + 2iP 1,80 a 1,40 a 1,80 a 1,22 a 1,86 aNAA 2 + 2iP 1,63 a 1,63 a 1,50 a 1,20 a 2,53 aNAA 1 + TDZ 2,00 b 2,33 b 1,00 a 1,33 a 2,37 aNAA 2 + TDZ 1,33 a 1,67 a 1,33 a 1,37 a 2,67 aNAA 1 + zeatin 2,20b 1,60 a 1,60 a 1,42 ab 3,70 cNAA 2 + zeatin 2,00 b 1,40 a 1,80 a 1,18 a 3,90 cPrůměrné hodnoty (30 opakování) ve sloupcích označené rozdílnými písmeny jsou statisticky průkazně odlišné na hladiněpravděpodobnosti 5%.ce BA a 2iP s NAA neměla na růst P. bifolia žádný vliv. Všechnyrostliny se v živném médiu s obsahem auxinu NAA ± cytokininyvyvíjely bez poruch morfogeneze.Vliv koncentrace IAA a cytokininů na růstové parametryin vitro semenáčůPo 8 měsících působení testovaných růstových regulátorův kultivačním médiu byly zjištěny průkazně vyšší přírůstky(cca o 50 %) nadzemní části i kořene v přítomnosti kinetinuu obou testovaných koncentrací IAA (tab. 3). Kinetin takéstatisticky významně zvýšil počet listů a kořenů, avšak nemělefekt na tvorbu hlíz. Naopak, cytokinin zeatin průkazně stimulovaltvorbu hlíz a růst kořene až na dvojnásobek ve srovnáníse samotným auxinem v obou koncentracích. Zajímavýje růstově stimulační vliv 2iP, který v přítomnosti NAA nemělžádný účinek, zatímco v kombinaci s IAA průkazně podpořilrůst nadzemní části, počet listů a kořenů. Thidiazuron v přítomnostiIAA růstové parametry neovlivnil na rozdíl od variantys auxinem NAA. Vývoj rostlin v živném médiu s obsahemauxinu IAA ± cytokininy <strong>pro</strong>bíhal bez poruchy morfogeneze.Vliv složení substrátu na růst ex vitro semenáčůPro přenosy do nesterilních ex vitro podmínek byly vybránysemenáče bez známek nekrózy listů a s alespoň jednou hlízou.Nadzemní část dosahovala délky nejméně 10 mm. Složenísubstrátu mělo významný vliv na <strong>pro</strong>cento rostoucíchrostlin (tab. 4). Na rozdíl od varianty s čistým perlitem, vesměsi perlitu s vápenitým jílem a hrabankou z původní lokalitydošlo k průkaznému zvýšení počtu (až o 25 %) rostoucíchjedinců a délky nadzemních částí vysazených semenáčů.Tab. 3 Vliv koncentrace IAA a cytokininů na růstové parametry 8 měsíců starých semenáčů P. bifoliaVarianty Počet Délkalistů kořenů hlíz nadz. část (mm) kořen (mm)IAA 1 1,15 a 1,47 a 1,56 a 0,99 a 1,55 aIAA 2 1,30 a 1,38 a 1,70 a 1,00 a 1,47 aIAA 1 + kinetin 2,13 b 2,13 b 1,38 a 1,95 b 2,13 bIAA 2 + kinetin 2,21 b 2,25 b 1,50 a 2,14 b 2,28 bIAA 1 + BA 1,33 a 1,33 a 1,33 a 1,13 a 1,17 aIAA 2 + BA 1,17 a 1,50 a 1,67 a 0,95 a 1,75 aIAA 1 + 2iP 1,40 a 1,40 a 1,80 a 1,04 a 1,90 aIAA 2 + 2iP 1,67 a 2,17 b 1,50 a 2,67 b 1,92 aIAA 1 + TDZ 1,67 a 1,67 a 1,33 a 1,40 a 1,50 aIAA 2 + TDZ 1,80 a 1,60 a 1,40 a 1,14 a 1,40 aIAA 1 + zeatin 2,00 ab 1,80 a 2,00 a 1,18 a 3,60 cIAA 2 + zeatin 2,40 b 1,60 a 2,10 a 1,36 a 3,50 cPrůměrné hodnoty (30 opakování) ve sloupcích označené rozdílnými písmeny jsou statisticky průkazně odlišné na hladiněpravděpodobnosti 5%.33
- Page 1 and 2: A C T AP R U H O N I C I A N A93 20
- Page 3: OBSAHVliv různých forem železa a
- Page 6 and 7: (Fe-EDDHA) je z dostupných slouče
- Page 8 and 9: Tab. 3 Chemické vlastnosti substr
- Page 11 and 12: Acta Pruhoniciana 93: 11-14, Průho
- Page 13 and 14: (obr. 3), nebo úzké, protáhlé s
- Page 15 and 16: Acta Pruhoniciana 93: 15-18, Průho
- Page 17 and 18: Pro inokulaci byly použity rostlin
- Page 19 and 20: Acta Pruhoniciana 93: 19-26, Průho
- Page 21 and 22: quite easily. In addition, seedling
- Page 23 and 24: Table 5 Segregation of leaf colour
- Page 25 and 26: Table 7 Percent relative vitality o
- Page 27 and 28: Acta Pruhoniciana 93: 27-30, Průho
- Page 29 and 30: Tab. 1 Rozsah sbírek a možnosti v
- Page 31: Acta Pruhoniciana 93: 31-35, Průho
- Page 35: Mitra, G. C. (1989): Biology, conse
- Page 38 and 39: poznatky o našich endemických je
- Page 40 and 41: Sorbus eximia - jeřáb krasovýSor
- Page 42 and 43: lze nalézt habituálně nejlépe v
- Page 44 and 45: 10 Čepel listů okrouhle vejčitá
- Page 46 and 47: Základní taxonomické studium rod
- Page 48 and 49: ný v našich přírodních populac
- Page 50 and 51: ZÁVĚRYPinus neilreichiana je v l
- Page 52 and 53: spěvku je osvětlit ožehavou a v
- Page 54 and 55: cekmenné stromky rozvětvené od z
- Page 56 and 57: začal buk plodit, první silnějš
- Page 59 and 60: Acta Pruhoniciana 93: 59-62, Průho
- Page 61 and 62: Table 1 Characteristics of generati
- Page 63 and 64: Acta Pruhoniciana 93: 63-67, Průho
- Page 65 and 66: nezřídka zaměňovány, přitom n
- Page 67: MSI (2001): Checklist of Magnolia C
- Page 70 and 71: in Eastern Slovakia, on the border
- Page 72 and 73: Table 2. Some genetic diversity par
- Page 74 and 75: heterozygosity of 0.269. Also, Konn
- Page 77 and 78: Acta Pruhoniciana 93: 77-82, Průho
- Page 79 and 80: pólové jadrá. Davis (1966) uvád
- Page 81 and 82: Obr. 17 P. spinosa (21. 4. 2009) -
- Page 83 and 84:
Acta Pruhoniciana 93: 83-88, Průho
- Page 85 and 86:
Na počátku pokusu měly všechny
- Page 87 and 88:
Tab. 9 Doronicum orientale ‘Leona
- Page 89 and 90:
Acta Pruhoniciana 93: 89-95, Průho
- Page 91 and 92:
Popis stanovištěDendrologická za
- Page 93 and 94:
Oenothera glazioviana O. erythrosep
- Page 95:
preference. Landscape and Urban Pla
- Page 98 and 99:
Tab. 1 Původ uloženého osivaDár
- Page 100 and 101:
Kapacita regeneračního procesu p
- Page 102 and 103:
u nás pěstují, prodávávají ne
- Page 104 and 105:
104Odrůda Šlechtitel Rok Skupina
- Page 106 and 107:
106Odrůda Šlechtitel Rok Skupina
- Page 108 and 109:
Výběr odrůd s uvedením cenných
- Page 110 and 111:
110
- Page 112 and 113:
Vědecký název Český název Če
- Page 114 and 115:
Hottonia palustris L. - žebratka b
- Page 116 and 117:
palustris Gaud. na Moravě. Diplomo
- Page 118 and 119:
na přírodním stanovišti. Uplatn
- Page 120 and 121:
také J. Holzbecher, J. Janouš a V
- Page 122 and 123:
Kultivar Hybridní skupina Původ B
- Page 124 and 125:
Kultivar Hybridní skupina Původ B
- Page 126 and 127:
Kultivar Hybridní skupina Původ B
- Page 128:
Horný, R., Soják, J., Webr, K. M.