Download - Fakultät 06

Jürschick, Johannes – Chemotaxis in µ-Slides mit 3-dimensionalen Gelmatrizes
3.1.2 Zellkultur in µ-Slides
Durch die Kunststofffolie, die den Boden des Slides bildet kann Gasaustausch mit der
Umgebungsluft beziehungsweise der CO2-angereicherten Atmossphäre eines Brutschrankes
stattfinden. Der Kunststoff des Slides kann bei ausreichender Equilibrierung in einer
beheizten Atmosphäre, in der eingefüllten Matrix gelöste Gase aufnehmen. Der Entstehung
von Luftblasen und störenden Gaseinschlüssen wird somit entgegengewirkt. Während der
chemotaktischen Untersuchungen können Zellen mit minimalem Aufwand über ein Heiz- und
Begasungssystem mit optimierten Überlebensfaktoren versorgt werden. Dadurch können in
den µ-Slides Bedingungen wie in einem Brutschrank eingestellt werden. Die Zellen bleiben
länger vital und können auch über eine Zeitspanne von mehreren Tagen hinweg beobachtet
werden. Die Höhe des Kanals entspricht mit 70µm in etwa dem Schärfebereich von häufig
verwendeten Objektiven von 4-facher bis 10-facher Vergrößerung. Die verwendete
extrazelluläre Matrix beeinflusst Morphologie und Migrationsverhalten der Zellen, so dass die
Eigenschaften 3-dimensionaler Zellmigration untersucht werden können, ohne dass sich die
Zellen dabei aus der Schärfeebene gängiger Objektive (10x/20x) bewegen. Die hydrophobe
Oberfläche des Kunststoffes wurde mit einer Beschichtung aus Collagen, Fibronektin oder
Poly-L-Lysin versehen, um adhärenten Zellen eine Kontaktfläche bereitzustellen.
Im Bezug auf Biokompatibilität und Eignung zur Zellkultur zeichnet sich das µ-Slides
Chemotaxis 3D durch folgende Eigenschaften aus.
– Gasaustausch möglich
– geringe Volumina nötig
– beschichtbar und biokompatibel
3.Material und Methoden 20