Download - Fakultät 06

Jürschick, Johannes – Chemotaxis in µ-Slides mit 3-dimensionalen Gelmatrizes
Abbildung 24: Verdünnungsgraph für Alexa 488 zwischen C0 und C100 der eingesetzten
Konzentrationen. Aufgetragen sind die eingesetzte Molarität gegen die Anzahl der gemessenen
Fluoreszenz Signale.
Der in Abbildung 24 dargestellte Verdünnungsgraph zeigt im Bereich des gesamten
verwendeten Konzentrationsspektrums einen linearen Zusammenhang zwischen dem
gemessenen FCS-Signal und der eingesetzten Molarität. Der ebenfalls linear ansteigende
Fehleraufschlag resultiert aus dem erzwungenen Nulldurchgang des Graphen, der
Abweichung in der zugrunde gelegten Steigung auslöst. Auf Grundlage dieser Messungen
wird im Folgenden aus den FCS-Messwerten auf die Molarität der Lösung in Abhängigkeit
der x-Position im Slide geschlossen.
Für alle unternommenen Messungen wurden 5% Maximaloutput des unter 4.1.2.
beschriebenen Argon/2 Lasers mit einer Wellenlänge von 488 nm verwendet. Als
Fixparameter wurden eine Diffusionszeit von 46µs und ein Struktur-Parameter von 10.2
angenommen. Der verwendete Einstellungsparameter Datensatz „AC-Standard_488 BP 505-
550“ enthielt als Vorgabe außerdem einen Emissionsfilter für Wellenlängen zwischen 505 und
550 nm. Analog zu den LSM-Messungen wurde die Messebene wieder anhand des
Unterschiedes im Brechungsindex zwischen Flüssigkeit im Slide und der Kunststoffschicht
darüber ermittelt. Der definierte Schritt in z-Richtung betrug 35µm in den Innenraum des
Kanalbereiches, so dass sich die Messebene in etwa in der Mitte des 70µm hohen Kanals
4. Ergebnisse 47