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Download - Fakultät 06

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Fast method:<br />

Jürschick, Johannes – Chemotaxis in µ-Slides mit 3-dimensionalen Gelmatrizes<br />

- Chemoattraktant-Lösung wird direkt in eines der<br />

beiden Reservoirs und Referenzlösung in das Andere<br />

gefüllt.<br />

- Dabei wird zuerst das Reservoir mit Hungermedium<br />

befüllt und mit Stöpseln verschlossen und<br />

anschließend das Reservoir mit Chemoattraktant, um<br />

ein Eindringen von Chemoattraktant-Lösung ins Gel<br />

durch Druckunterschiede zu verhindern.<br />

Slow method:<br />

- Zuerst werden beide Reservoirs mit Chemoattraktantfreier<br />

Lösung gefüllt und die Stutzen E und F<br />

anschließend verschlossen.<br />

- 30 µl Chemoattraktant-Lösung mit der doppelten<br />

Konzentration der gewünschten Endkonzentration<br />

werden auf Reservoir C pipettiert.<br />

- Mit einer geeigneten Pipettenspitze werden 30 µl<br />

Flüssigkeit aus Reservoir D gesaugt, um eine<br />

langsame Verteilung des Chemoattraktant innerhalb<br />

der Kammer zu erreichen.<br />

10. Anhang 83

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