Download - Fakultät 06

Jürschick, Johannes – Chemotaxis in µ-Slides mit 3-dimensionalen Gelmatrizes
Die FMI parallel zum Gradienten sind für alle Chemotaxis Experimente (+/-) betragsmäßig in
einem Bereich um 0,3. Die FMI senkrecht zum Gradienten sowie alle Kontrollmessungen
bewegen sich im weitesten Sinne um den Nullpunkt. Zwischen 2D und 3D Versuchsansätzen
bestehen hier keine nennenswerten Unterschiede. Die Verlagerung des Massenschwerpunkts
weist für die Versuche in 3D leicht höhere Werte, aber auch eine höhere Streuung der
Ergebnisse auf. Die unterschiedlichen Migrationsmodi scheinen auch hier keinen
entscheidenden Einfluss zu haben. Die Geschwindigkeit der Zellen war in 2D und 3D
Experimenten annähernd exakt gleich. Nur die Zellen der Positivkontrolle in 2D bewegen
sich merklich schneller. Die Negativkontrolle weist in beiden Fällen leicht niedrigere
Migrationsgeschwindigkeiten auf. Der Mittelwert der Geschwindigkeit aus allen betrachteten
Experimenten entspricht mit ~25,7µm/h in etwa dem in der Literatur angegebenen
Wertebereich für Fibroblasten von 30-40 µm/h. [Even-Ram, 2005]
Die Verwendung von synthetischen Hydrogelen im µ-Slide Chemotaxis 3D ist möglich.
Eine gerichtete Migration der Zellen in den Gelen hängt aber von zu vielen Parametern ab, als
dass sie im Rahmen dieser Arbeit noch hätte erfolgreich gezeigt hätte werden können.
Die optische Qualität der Ergebnisse ist gut und spricht weiteren Experimenten mit
synthetischen Matrizes eine nicht unbedeutende Rolle zu.
Obwohl für HL-60 Zellen mit Abschluss der Versuchsreihen noch keine reproduzierbaren
Chemotaxis-Daten vorlagen, konnte anhand von Einzelergebnissen angedeutet werden, dass
die Etablierung des Gradienten keinen Einfluss auf das Migrationsverhalten der Zellen
ausübt. Bei Analyse des FMI in Abhängigkeit von der Zeitkoordinate, wie in Abbildung 34
dargestellt, zeigt sich ein konstant hoher Wert für den Betrag des ǁ(x)-FMI und ein Wert nahe
0 bezogen auf den ⊥(y)-FMI. Dabei fällt ein stark verrauschter Bereich während der ersten 30
Minuten der Messung auf.
5. Diskussion und Ausblick 68