thesis

40 Anatomie et physiologie du système nerveux
A
extracellular
V m
intracellular
I V r
intracellular
electrode
.01 - .1 µm
sharp
electrode
bad seal
Amplifier
reference
electrode
B C
gigaseal
1-2 µm
PC
patch
electrode
(whole cell)
Figure 1.12 – Enregistrements intracellulaires. A. Principe des enregistrements intracellulaires.
B. Électrode fine. C. Électrode large. (Brette et Destexhe 2012)
temps réel le courant à injecter (dépendant du potentiel de membrane) pour
simuler l’injection de conductances.
L’électrode joue un rôle central dans ces techniques expérimentales (voir
figure 1.12). L’extrémité peut être fine (sharp electrode) (Ling et Gerard 1949,
Steriade et al. 2001, Crochet et al. 2006) pour permettre à l’électrode de traverser
la membrane, ou large (patch-clamp microelectrode) (Hamill et al. 1981, Monier
et al. 2008). Dans ce dernier cas, une faible surface de la membrane est aspirée de
manière à la perforer pour réaliser une jonction imperméable entre l’électrode et
la cellule.
Dans des enregistrements de courant imposé, le courant passant à travers l’électrode
génère une tension par la loi d’Ohm, car l’électrode possède une résistance
intrinsèque. Le voltage enregistré résulte donc de la combinaison du potentiel de
membrane et de ce potentiel d’électrode. Le signal recherché étant le potentiel de
membrane, il est nécessaire d’éliminer du signal brut le voltage dû à l’électrode, ce
que l’on appelle compensation de l’électrode (Brette et al. 2008). Ce voltage
est approximativement égal à Ve = ReI où I est le courant injecté, connu. La
résistance de l’électrode est cependant inconnue, et peut de plus évoluer au cours
d’une même expérience. La technique du bridge balance consiste à estimer manuellement
cette résistance au début de l’expérience, mais elle n’est pas toujours