SEIX 17-20 octobre 2005 - Atelier Calcium

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des cellules de la papille dermique du follicule pileux humain (fibroblastes). La papille dermique se situe à l‟extrémité de la racine du poil et lui apporte tous les éléments nutritifs nécessaires à sa croissance des kératinocytes de la gaine épithéliale externe du follicule pileux humain. Cette gaine est une continuité de l‟épiderme et contient au niveau du site d‟insertion du muscle arrecteur des cellules souches du cheveu. La transfection est réalisée avec la lipofectine pour les kératinocytes. Le JETPEI TM (Qbiogen) comme agent transfectant donne de meilleurs résultats avec les fibroblastes. Ce produit est moins toxique et permet une meilleure survie cellulaire. Les cellules du follicule pileux sont stimulées avec la protéine noggin (1 µg/ml) produite au laboratoire grâce à une lignée de cellules d‟ovaires de hamster, les CHO – B3. Nous avons pu mettre en évidence une augmentation intracellulaire de calcium dans le cytoplasme des cellules du follicule pileux quelques minutes après addition de noggin dans le milieu. Il reste à déterminer le rôle crucial que pourrait jouer le calcium dans le cycle pilaire à la suite de l‟intervention de noggin. Bibliographie Kevin Truong, Asako Sawano, Hideaki Mizuno, Hiroshi Hama, Kit I. Tong, Tapas Kumar Mal, Atsushi Miyawaki and Mitsuhiko Ikura : FRET – based in vivo Ca2+ imaging by a new calmodulin – GFP fusion molecule. Nat. Struct. Biol. 2001 dec ; 8(12) : 1069 – 1073 Masanori Osawa, Hiroshi Tokumitsu, Mark B. Swindells, Hiroyuki Kurihara, Masaya Orita, Tadao Shibanuma, Toshio Furuya and Mitsuhiko Ikura : A novel target recognition revealed by calmodulin in complex with Ca2+calmodulin dependent kinase kinase. Nat. Struct. Biol. 1999 Sep ; 6 (9) : 819 -24. V. A. Botchkarev, N. V. Botchkareva, M. Nakamura, O. Huber, K. Funa, R. Lauster, R. Paus and B. A. Gilchrest : Noggin is required for induction of the hair follicle growth phase in postnatal skin : FASEB J. 2001 Oct ; 15(12) : 2205 - 14. Leclerc C. , Daguzan C. , Nicolas MT. , Chabret C. , Duprat AM. , Moreau M. , : L – Type calcium channel activation controls the in vivo transduction of the neuralizing signal in the amphibian embryos. Mech. Dev. 1997 Jun ; 64 (1-2) : 105 - 10 22
ASHURA : LE FRET PAR HAMAMATSU UTILISATION D’UNE CAMERA TRI- CCD ORIGINALE POUR L’ANALYSE DU FRET EN TEMPS REEL Bruno Combettes Hamamatsu Photonics France rue du saule trapu, parc du moulin de Massy, BP 229 91882 MASSY Cedex Caméra tri-CCD CYR prism Nouveau prisme : Cyan, Yellow, Red 23
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