SEIX 17-20 octobre 2005 - Atelier Calcium

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S S 0 1 S1 * K *( L) K *( L) Mesure du ligand lié Si l‟on mesure par dialyse la quantité de ligand liée par complexe, alors on a : S 0 = 0 et S 1 =1 En général, on a pour convention d‟appeler ce signal K *( L) 1 K *( L) K est dans ce cas la constante d‟association macroscopique (ou constante stœchiométrique d‟association) et la constante individuelle du site (ou constante microscopique d‟association). On a : Titration enthalpique par microcalorimétrie isotherme S= H ; S 0 =0 ; S 1 = H1 Puisque G°=-R*T*Ln(K), on a S° = ( H°- G°)/T. On a donc une mesure complète des caractéristiques thermodynamiques du système que l‟on étudie. 66
Titration conformationelle du système S S 0 1 S1 * K *( L) S0 S0 * K *( L) ( S1 S0 K *( L) 1 K *( L) )* K *( L) et donc, S ( S1 S0)* K *( L) 1 K *( L) On accède à une mesure du changement conformationnel au travers de toutes les mesures physico-chimiques possibles (Fluorescence, spectroscopie UV-visible, RMN, ....). Mesure enzymatique Considérons un enzyme E qui peut lier un substrat S. Cet enzyme transforme le substrat S en produit P. On a le modèle suivant : E + S ES ----->E + P H H 1 0 1 * K *( L) K *( L) 67
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