guía práctica de experimentos para - Ecologia e Gestão Ambiental
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cantidad será expresada en la concentración <strong>de</strong><br />
Clorofila a. La Clorofila a será medirá in vivo con<br />
un fluorímetro o será procesada <strong>para</strong> el análisis<br />
espectofotométrico (Holm-Hansen 1978,<br />
Mad<strong>de</strong>n, Day 1992). Los cambios en la<br />
concentración <strong>de</strong> oxígeno disuelto, pH y<br />
temperatura en el agua serán medidos con un<br />
conjunto <strong>de</strong> electrodos. Análisis<br />
complementarios <strong>de</strong> la cantidad total <strong>de</strong><br />
bacterias en el agua podrán ser provistos con<br />
microscopios <strong>de</strong> fluorescencia en muestras<br />
teñidas con DAPI (Porter, Feig 1980).<br />
2. Diseño experimental<br />
El diseño <strong>de</strong>l experimento consi<strong>de</strong>ra 3 variantes<br />
-3<br />
<strong>de</strong> concentraciones diferentes <strong>de</strong> PO4 : agua<br />
natural <strong>de</strong> lago usada en la opción <strong>de</strong> control,<br />
~20 μg dm -3 y ~200 μg dm -3 . Esto es <strong>para</strong><br />
<strong>de</strong>mostrar cómo el mecanismo enzimático <strong>de</strong> la<br />
liberación <strong>de</strong> P funciona en diferentes niveles <strong>de</strong><br />
cantidad <strong>de</strong> ortofosfato. Cada opción se pre<strong>para</strong><br />
por triplicado en un recipiente <strong>de</strong> vidrio <strong>de</strong> al<br />
menos 10 dm -3<br />
(<strong>de</strong>berían pre<strong>para</strong>rse 9<br />
recipientes en total).<br />
El agua tomada <strong>de</strong>l lago <strong>de</strong>bería ser primero<br />
filtrada a través <strong>de</strong> una red <strong>de</strong> plancton <strong>de</strong> malla<br />
GUÍA PRÁCTICA DE EXPERIMENTOS PARA ECOHIDROLOGÍA<br />
<strong>de</strong> 50 µm <strong>para</strong> eliminar el zooplancton, que se<br />
alimenta <strong>de</strong> fitoplancton y podría ser una fuente<br />
<strong>de</strong> subestimación <strong>de</strong> la Clorofila a durante el<br />
experimento. A continuación, el agua <strong>de</strong>be ser<br />
filtrada otra vez a través <strong>de</strong> una red <strong>de</strong> plancton<br />
<strong>de</strong> maya <strong>de</strong> 20 µm <strong>para</strong> eliminar el fitoplancton.<br />
El fitoplancton <strong>de</strong>be cuidadosamente recogido<br />
en un recipiente mientras se pre<strong>para</strong> <strong>para</strong> la<br />
utilización <strong>de</strong> 3 variantes <strong>de</strong> los <strong>experimentos</strong><br />
(Figura 1). Después <strong>de</strong> la filtración <strong>de</strong>be ser<br />
hecha una medición inicial <strong>de</strong> la concentración<br />
<strong>de</strong> ortofosfato en el agua. Una vez que se<br />
-3<br />
conozca la concentración se pre<strong>para</strong> 30 dm <strong>de</strong><br />
agua <strong>para</strong> cada variante por la dilución <strong>de</strong> agua<br />
<strong>de</strong>l lago con agua <strong>de</strong>stilada <strong>para</strong> obtener una<br />
-3 -3<br />
concentración baja <strong>de</strong> PO4 (~20 μg dm ) y por<br />
adición <strong>de</strong> K2HPO4. <strong>para</strong> conseguir la más alta<br />
(~200 μg dm -3<br />
). Rellenar los recipientes con<br />
agua y añadir cuidadosamente el plankton<br />
recogido en cantida<strong>de</strong>s idénticas <strong>para</strong> cada<br />
recipiente. En el punto <strong>de</strong> partida <strong>de</strong>l<br />
experimento todos los parámetros <strong>de</strong>ben ser<br />
analizados.<br />
Los recipientes <strong>de</strong>ben ser <strong>de</strong>jados <strong>para</strong> su<br />
incubación, bien iluminados, durante 2 semanas.<br />
Las muestras <strong>para</strong> los análisis <strong>de</strong>ben tomarse, al<br />
menos, cada dos días<br />
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