guía práctica de experimentos para - Ecologia e Gestão Ambiental

B. Llimnoperna fortunei será recogida del
entorno cortando el viso y después de su
traslado al laboratorio, serán eliminadas en un
vaso con una superficie irregular para permitir
que su viso se resintetice. Todos los animales
correctamente unidos y que muestren una
actividad de filtración se considerarán
adecuados para el experimento, de lo contrario
serán eliminados.
Se recogerán y transportarán muestras de agua
hasta el laboratorio en envases a 4 °C y
colocados en decantadores para poder obtener
SPM, para ser física y químicamente
caracterizadas y para preparar el trabajo de
suspensión, a partir de agua dulce semidura
(EPA,…….).
Total de agua, SPM y análisis de heces
Una taza de filtros pesada con anterioridad (GF
0,7 mm, 13 mm de diámetro) se usará para
determinar SPM por gravimetría (100°C 24 hs),
Una determinación en bruto de materia orgánica
será estimada por muestras reducidas a cenizas
(600°C, x hs MÉTODOS ESTÁNDAR).
El contenido total de hidrocarbono será
cuantificado por IR.
La composición de la mezcla se determinará por
extracción con disolventes, purificación e
identificación y cuantificación por el GC-MS. Por
ultimo, la relación C:N se determinará a través
de un analizador elemental.
Experimentos de laboratorio
Se necesitará un laboratorio húmedo
preferiblemente con controles de fotoperíodos y
temperatura.
• 20 envases de vidrio para los controles y
grupos tratados;
• Dispositivos de decantación para la
separación de SPM;
• Envases con agitación para la preparación en
suspensión de SPM;
• turbidímetro, jeringas, soportes de filtro, filtros
y tazas pesados con anterioridad, para seguir
la evolución de la deposición;
• Balanza para determinar el tamaño de los
animales;
• Horno de mufla para determinar el SPM y
también el peso del tejido seco y el peso del
tejido seco libre de cenizas;
• Analizador elemental;
• IR;
• GC-MS;
GUÍA DE EXPERIMENTOS PRÁCTICOS PARA ECOHIDROLOGÍA
• Baño ultrasónico para la extracción;
• balanza;
• agitador magnético para mezclar
hidrocarburos preparados.
Análisis de datos
• ordenadores;
• hoja organizadora de datos;
• software de gráficos básicos y estadística.
4. Descripción del experimento
ETAPA 1. Tras la depuración de los animales,
éstos serán agrupados de manera aleatoria y
expuestos al aire durante una hora. Todos los
acuarios experimentales serán rellenados con 2l.
de SPM en suspensión y agitación; una muestra
de agua será recogida antes de añadir los
animales (cinco de tamaño estándar) y el
momento cero será registrado para cada envase
cuando los animales comiencen a mostrar la
actividad de filtro (esta vez deberá grabarse).
Estas muestras de agua se usarán para análisis
químicos. Las muestras de agua deberán ser
tomadas a las 0, 0.5, 1, 3, 6, 12 y a las 24 horas,
y se realizará la determinación de la tasa de
deposición por las lecturas de filtración y
turbidez.
El experimento continuará hasta que los valores
de turbidez en el control se hagan constantes.
Al final de los experimentos, los animales serán
eliminados y medidos, después abiertos a través
de un corte en los músculos abductores y luego
pesados. Se eliminarán y pesarán las partes
blandas para determinar la biomasa fresca,
luego se determinará el peso muerto y el peso
libre de ceniza para estimar la tasa de
deposición relacionada con la biomasa del
animal.
Se realizará una comparación de la eficacia de
la biodeposición en diferentes concentraciones
de SPM.
Los Pellets y el SPM que permanezcan en el
acuario serán usados para determinar las
relaciones C:N.
ETAPA 2. Un preparado de SPM enriquecido
con hidrocarbonos en una concentración similar
a la que ocurre durante un derrame de petróleo,
estará en suspensión en agua artificial por
agitación.
La concentración que vaya a ser usada se
estimará mediante un ensayo NOEC o LD10 96
59