guía práctica de experimentos para - Ecologia e Gestão Ambiental
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FOR ECOHYDROLOGY<br />
Don<strong>de</strong>: V – volumen experimental [mL]<br />
Chla0, Chla1 – la concentración inicial y final <strong>de</strong><br />
clorofila a [mg L-1], respectivamente<br />
Chla’0, Chla’1 – la concentración inicial y final<br />
<strong>de</strong> clorofila a en control [mg L-1]<br />
t – tiempo <strong>de</strong>l experimento en horas<br />
La Clorofila a se analizará en un fluorímetro o<br />
usando el método <strong>de</strong> extracción <strong>de</strong> etanol.<br />
b) El contenido total <strong>de</strong> material en<br />
suspensión se <strong>de</strong>terminará filtrando agua a<br />
través <strong>de</strong> filtros <strong>de</strong> 0.45 mm <strong>de</strong> peso conocido y<br />
secándolo a 105 o C (24h). El contenido <strong>de</strong><br />
material mineral en suspensión se <strong>de</strong>terminará,<br />
a continuación, calentando los filtros a una<br />
temperatura <strong>de</strong> 500 o<br />
C (24h). El contenido <strong>de</strong><br />
materia orgánica en suspensión se calculará a<br />
través <strong>de</strong> la diferencia entre contenidos <strong>de</strong><br />
materia en suspensión total y orgánica.<br />
Métodos <strong>para</strong> la evaluación <strong>de</strong> parámetros<br />
reproductivos:<br />
a) El tamaño medio <strong>de</strong> las nidadas (CS) se<br />
calculará <strong>de</strong> acuerdo a:<br />
CS = E / Na<br />
Don<strong>de</strong>:<br />
E – número <strong>de</strong> huevos<br />
Na – número <strong>de</strong> dáfnidos adultos<br />
b) Tamaño medio <strong>de</strong> las crías (BS) se<br />
calculará <strong>de</strong> acuerdo a:<br />
BS = E / Nc<br />
Don<strong>de</strong>:<br />
Nc – número <strong>de</strong> huevos cargados por los<br />
dáfnidos<br />
c) Proporción <strong>de</strong> huevos cargados por<br />
adultos (Ad) será evaluado <strong>de</strong> acuerdo a:<br />
Ad = Nc / Na<br />
d) La tasa <strong>de</strong> cambio <strong>de</strong> abundancia <strong>de</strong> la<br />
población <strong>de</strong> Daphnia sp. ( r ) se calculará<br />
mediante el uso <strong>de</strong> la ecuación:<br />
r = (ln Nt – ln N0) / Dt<br />
Don<strong>de</strong>:<br />
N0, Nt – abundancia <strong>de</strong> la población inicial y<br />
final respectivamente<br />
GUÍA DE EXPERIMENTOS PRÁCTICOS PARA ECOHIDROLOGÍA<br />
t – tiempo entre las dos observaciones (en horas<br />
– durante <strong>experimentos</strong> <strong>de</strong> corta duración o en<br />
días – durante <strong>experimentos</strong> <strong>de</strong> larga duración).<br />
Métodos <strong>para</strong> la evaluación <strong>de</strong> reciclado <strong>de</strong><br />
nutrientes:<br />
a) El agua <strong>para</strong> análisis químicos se filtrará a<br />
través <strong>de</strong> filtros Whatman GF/F y analizada con<br />
fosfato <strong>de</strong> fósforo (P-P04) y una concentración<br />
<strong>de</strong> nitrógeno amoniacal (N-NH4) <strong>de</strong> acuerdo con<br />
el método colorimétrico (Greenberg et al. 1992),<br />
nitrito y nitrato <strong>de</strong> nitrógeno (N-NO2/3) <strong>de</strong><br />
acuerdo a Golterman et al. (1988). Se digerirán<br />
muestras <strong>de</strong> agua no filtrada <strong>para</strong> un análisis<br />
TP, por ejemplo con MERCK MW 500<br />
Microwave Digestion System, y <strong>de</strong>terminadas<br />
por el método <strong>de</strong> ácido ascórbico (Greenberg et<br />
al. 1992). La absorbencia se medirá con un<br />
espectrofotómetro.<br />
2. Diseño experimental<br />
El experimento incluirá dos tratamientos: A<br />
(algas) y SM (materia en suspensión). El<br />
experimento se realizará en vasos <strong>de</strong> cristal <strong>de</strong> 2<br />
litros y se harán 5 repeticiones <strong>para</strong> cada<br />
tratamiento (A & SM). Todos los vasos <strong>de</strong><br />
laboratorio se llenarán con agua filtrada obtenida<br />
en un ecosistema natural. Se necesitará usar<br />
individuos Daphnia 0.8-1.2 mm <strong>de</strong> longitud (e.g.<br />
D. hyaline, D. cucullata, o D. longispina etc.). Se<br />
pue<strong>de</strong>n usar mono específicas culturas <strong>de</strong> algas<br />
u organismos proce<strong>de</strong>ntes <strong>de</strong> ecosistemas<br />
naturales (<strong>de</strong> los cuales se tendrá que hacer un<br />
análisis inicial <strong>de</strong> la comunidad <strong>de</strong> fitoplancton).<br />
El experimento se realizará en un régimen<br />
claro/oscuro <strong>de</strong> 12:12 h a 21 o C.<br />
Tratamiento A (algas) incluirá:<br />
a) control – 2 L agua + concentración inicial <strong>de</strong><br />
alga comestible (con 5 repeticiones);<br />
b) tratamiento A estable - 2 L agua +<br />
concentración inicial <strong>de</strong> alga comestible + 50<br />
individuos <strong>de</strong> Daphnia sp. (con 5<br />
repeticiones);<br />
c) tratamiento A inestable - 2 L agua +<br />
concentración inicial <strong>de</strong> alga comestible + 50<br />
individuos <strong>de</strong> Daphnia sp. (con 5<br />
repeticiones). Los vasos <strong>de</strong> precipitados se<br />
colocarán en un agitador magnético (80 ± 20<br />
rpm) en días <strong>de</strong> alta afluencia <strong>de</strong> simulación e<br />
inestables condiciones hidrológicas.<br />
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