Train the brain: studio clinico e sperimentale dell'efficacia di un ...

Train the Brain
interleukina 1a e interleukina 11; M-CSF, monocite colony stimulating factor;. PDGF-BB, platelet-derived growth factor
BB; TNF-related apoptosis-inducing ligand receptor 4
Verrà valutato anche il livello plasmatico di IGF-1, molecola correlata con l’esercizio fisico e con il catabolismo della
proteina beta-amiloide (Cotman e Berchtold, 2002; Carro et al., 2002)
Lo screening di questi marcatori sarà effettuato su aliquote di sangue prelevate per i test bioumorali tramite
immunoblotting (Ray, Britschgi et al., 2007)
- parametri stress ossidativo (AOPP, FRAP, GSH).
AOPP (Prodotti di Ossidazione Avanzata delle Proteine: v.n.122,5-171,5 nmol/ml)
FRAP (Attività Ferro Riducente Plasmatica: v.n. >2,2 nmol/)
GSH (Glutatione totale: v.n. 0,5-1,5 nmol/ul)
La valutazione dello stato di “stress ossidativo”, una condizione che comporta una alterata utilizzazione dell’ossigeno da
parte delle cellule nervose, nella fattispecie esponendo le stesse ad un danno conseguente agli effetti deleteri della
ossidazione di componenti cellulari. L’analisi permette di dosare i livelli circolanti di marcatori dello stress ossidativo
(proteine ossidate) o protettori nei confronti dello stesso ed indicatori dello stato redox cellulare (il glutatione e l’attività
ferro-riducente), fattori che risultano cruciali nel controllo dei processi ossidativi cellulari.
La determinazione degli AOPP (prodotti di ossidazione avanzata delle proteine) viene effettuata nel plasma secondo il
protocollo descritto da Witko-Sarsat [1996].
Il contenuto di glutatione (GSH) totale è determinato con il metodo della cinetica enzimatica descritto da Tietze [1969] e
modificato da Baker [1990]. attraverso un lettore di piastre ELISA.
La determinazione della FRAP è con l’ausilio di un lettore di piastre ELISA (Labsystem Multiskan Plus MKII-Lab system
Milano) seguendo il protocollo descritto da Benzie e Strain [1996].
Conservazione del campione ematico
Aliquote di plasma e siero saranno conservate, per ogni soggetto, in un apposito sistema di stoccaggio e conservazione
(sistema PACE, CryoBioSystem) per successive analisi. Il materiale appartenente a ciascun paziente (sangue intero)
potrà essere identificato per la durata massima di 5 anni; durante tale periodo, il paziente potrà richiedere la distruzione
del proprio campione in qualsiasi momento. Al termine dei 5 anni il campione sarà reso totalmente anonimo mediante
attribuzione di un nuovo codice alfanumerico casuale (3 lettere e 2 numeri alternati, esempio C2X3R) che verrà riportato
anche sulla scheda di registrazione, mentre la porzione della scheda recante il precedente codice (es. TDB 004) sarà
eliminata. In tal modo, non disponendo di alcun elenco che metta in correlazione il precedente codice dello studio al
nuovo codice casuale sarà impossibile identificare il paziente, e allo stesso tempo il materiale e le informazioni correlate
potranno essere impiegate per studi futuri. La distruzione del campione in base alla volontà del paziente sarà possibile
entro 5 anni dall’esecuzione del prelievo, cioè prima che il nuovo codice casuale venga attribuito al materiale biologico e
alla scheda di registrazione.
4.5 Fase 3: intervento (durata per ciascun soggetto 7 mesi).
Verranno messi in atto i protocolli di intervento che comprenderanno attività fisiche aerobiche e attività cognitivamente
stimolanti sotto dettagliati. Per la parte di esercizio fisico sono previsti protocolli di attività fisica aerobica con tre sedute
settimanali di training della durata di un’ora ciascuna, realizzati, con il contributo di animatori, sotto il controllo di
fisioterapisti e di un medico con valutazione del dispendio energetico. Al terzo mese il carico di lavoro sarà aggiustato in
funzione del risultato della nuova valutazione cardiovascolare (sovrapponibile a quella baseline), in modo da ottenere un
effetto allenante progressivo.
Per la parte di stimolazione cognitiva, verranno organizzate, sotto il controllo di operatori dedicati, le attività
cognitivamente stimolanti sotto dettagliate che verranno distribuite nell’arco di tre mezze giornate settimanali. Al terzo
mese verrà effettuata una valutazione intermedia cognitiva equivalente a quella baseline per tutti i soggetti
dell’intervento.
Tutti i soggetti partecipanti all’intervento saranno coperti da assicurazione per eventuali infortuni nei locali dell’intervento
per tutta la durata del progetto.
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