View/Open - JUWEL - Forschungszentrum Jülich

3 .1 .2 .1 Applikation
Zunächst wurden 227,6 mL CaC1 2-Lösung (10 mM) in den
Container gefüllt, danach 240 pL MTBE zugesetzt und der Applikationscontainer
verschlossen . Um das radioaktive MTBE in diese
Lösung zu bringen, wurde mit dem Magnetrührfisch und einem äußeren Magnet
bruchstelle zur Break-Seal-Ampulle zerschlagen . Die Lösung wurde dann mehrfach
telt, um eine vollständige Vermischung zu gewährleisten .
3 .1 .2.2 Fallenaufbereitung
Material und Methoden
Die Applikationslösung bestand aus CaC1 2-Lösung (10 mM),
MTBE für die Spektroskopie (Fa . Merck, Darmstadt) und radioaktivem
[«,«'-'"C]-MTBE (Fa . Sigma Chemical Co ., St .Luis, USA) .
Da es sich bei MTBE um einen bei Raumtemperatur sehr flüchtigen
Stoff handelt, wurde das radioaktive MTBE in einer Glas-
Break-Seal Ampulle angeliefert . Um gasförmige Verluste beim
Ansetzen der Stammlösung oder beim Applizieren auszuschließen,
wurde ein spezieller Applikationscontainer an diese Ampulle
angeflanscht (Abb . 7) . Dieser verfügte über ein Vorratsreservoir
für die CaC1 2-Lösung, ein doppeltes Sicherungssystem aus einem
Teflon/Glas-Hahn mit abschließendem Silikon-Septum und
einem Magnet-Rührfisch .
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Abb . 7 : Schema des
Applikationscontainers
für die Abbaustudien .
die Sollgeschüt-
Aus dieser Lösung wurden dann mit einer 20 cm Edelstahlkanüle und einer gasdichten
Glasspritze durch das Septum und die Kükenbohrung jeweils 5 mL Lösung entnommen und
in einen Erlenmeyerkolben mit Boden getropft . Die Nadelspitze stach hierbei an verschiedenen
Stellen unter den Boden ein, um eine möglichst gleichmäßige Verteilung im feuchten
Boden einzustellen . Die Spritze und Kanüle wurden für die sterilen Varianten jeweils durch
sterilisierte Geräte ausgetauscht . Nach dem Untermischen der Applikationslösung wurde
unmittelbar die Gasfalle auf das Kultivierungssystem (Abb . 6) aufgesetzt .
An jedem Probennahmetag wurden zunächst die Fallen und die entsprechenden
Erlenmeyerkolben getrennt . Hierzu wurde der Kolben 3 min über den Belüftungsstutzen mit
einem Stickstoff-Strom (NZ) von 100 mL min - ' gespült . Dadurch sollten die in der Gasphase
befindlichen Moleküle in der Falle adsorbiert werden . Anschließend wurde die Falle entfernt
und die einzelnen Fraktionen separiert . Die Aktivkohle (7 g) wurde mit einer Kugelmühle
(Fa . Retsch) gemahlen und homogenisiert, bevor 3 x 100 mg Aliquote mit mikrokristalliner
Zellulose vermischt im Verbrennungsautomaten (Oxidizer, 3 .4 .2 .1 .1) verascht wurden .
Der verbleibende Rest an Aktivkohle wurde dann mit 20 mL Acetonitril p .a . (Fa . Merck,
Darmstadt) für 30 min bei 1750 U min - ' mittels einer Schüttelmaschine (Typ SM 25A, Fa .
Bühler, Tübingen) extrahiert . Zur Sedimentation der Aktivkohle wurde dieses Gemisch dann
bei 2000 U min - ' zentrifugiert (Typ GPKR, Fa . Beckmann, München) . Der Überstand wurde
abdekantiert und nochmals in einer Ultrazentrifuge (Typ Mikro Rapid, Fa . Hettich, Tuttlin-