Quantitative Analyse von Arzneistoff-Membran-Wechselwirkungen ...

Potentiometrischen Bestimmung von Verteilungskoeffizienten
3.2.4 Die Bestimmung von Verteilungskoeffizienten
Die Verteilungskoeffizienten in n-Octanol und PGDP bestimmte ich über separate Messungen bei
25 ± 0.2°C mit entsprechende Mengen an Arzneistoff zwischen 0.12 bis 0.18 mM bei mindestens drei
unterschiedlichen Volumenverhältnissen rV . Ich verwendete 0.1 bis 1.0 ml organische Phase mit 20 ml
ISA-Wasser (rV zwischen 0.005 und 0.05). Alle Titrationen begannen im basischen Milieu und pro
Verbindung wurden die Titrationskurven als MultiSet ausgewertet. Für die logP- Titrationen wurde
ISA-wassergesättigtes n-Octanol und gefiltertes PGDP eingesetzt. Der Einsatz von n-Octanol bzw.
PGDP gesättigtem ISA-Wasser war apparativ nicht möglich. Ein solubility factor der Standardsoftware
berücksichtigte die Löslichkeiten der organischen Phasen in Wasser.
Die Arzneistoffproben wurden zur Ermittlung von logPm-Werten mit definierten Mengen frisch
hergestellter Liposomensuspension versetzt. Dieses Gemisch wurde mindestens 1 min von Hand
durchgeschüttelt und automatisch mit ISA-Wasser auf 15 oder 20 ml aufgefüllt. Die Titrationen
starteten bei pH 10.2 nach einem einminütigem kräftigen Durchrühren des endgültigen Ansatzes. Die
Messungen wurden in einem Konzentrationsbereich von Phospholipid zwischen 0.65 mg/ml bis
20 mg/ml (0.88 mM - 26.67 mM), mindestens zweimal bei einer Konzentration, durchgeführt. Das
molare Mengenverhältnis Phospholipid : Arzneistoff lag mindestens zwischen 4 und 5 zu 1 (Avdeef et
IP
al. 1998). Aus dem Mittelwert des Verteilungskoeffizienten der Ionen logPm wurde durch Addition
von 0.82 der Oberflächen-Ionenpaar-Koeffizienten logKSIP errechnet.
Die scheinbaren Verteilungskoeffizienten der untersuchten Arzneistoffe bei pH 7.4 und 5.4 wurden
unter Verwendung der korrespondierenden logP/logPion-Paare der n-Octanol/Wasser- und PGDP/
Wasser-Systeme berechnet. Im liposomalen Verteilungssystem wurden die entsprechenden logPm /
logKSIP-Paare herangezogen.
Prochlorperazin und Thiethylperazin lagen als Dimaleate vor. Für das Maleat-Ion wurden im pH-
Bereich zwischen 2.5 und 10.5 ein pKa-Wert von 5.78 ± 0.01, ein logP in n-Octanol von -0.38 ± 0.10
und in PGDP von -0.21 ± 0.14 potentiometrisch gemessen, die den veröffentlichten Werten von
pKa = 5.80 und logP = -0.40 (n-Octanol) entsprachen (Sirius Analytical Instruments 1994).
3.3 Systemvalidierungen
3.3.1 Kosolventeinflüsse auf die pKa-Wert-Bestimmung
Eigene Untersuchungen zur negativen Verschiebung (bias) bei schwachen Basen in Methanol/Wasserund
Dioxan/Wasser-Gemischen wurden anhand des basischen pKa-Wertes von Procain vorgenommen.
In rein wässrigem Lösungsmittel fand ich einen pKa-Wert von 9.00 ± 0.01 (n = 3), der mit
dem Literaturwert identisch war (Pharmazeutische Stoffliste 1995). Die einzelnen Extrapolationen
sind in Tab. 1 zusammengefasst.
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