Dissertationsschrift - Ralf Liedke 1999

7 Arbeitsvorschriften 133
7.1.5.1 Charakterisierung der Präparate nach Oximierung und Silylierung
Chemikalien
• Präparate aus 7.1.2, 7.1.3 und 7.1.4
• Xylit (Merck, Darmstadt)
• Trehalose-Dihydrat (Fluka, Buchs CH)
• Hydroxylammoniumchlorid (Merck, Darmstadt)
• Pyridin, zur Analyse (Merck, Darmstadt)
• N,O-Bis-(trimethylsilyl)-acetamid (Fluka, Buchs CH)
• 1,1,2-Trichlortrifluorethan (Sigma-Aldrich, Steinheim)
• Trimethylchlorsilan (Fluka, Buchs CH)
Oximierungsreagenz
50,0 mg Xylit, 50,0 mg Trehalose als interne Standards und 2,50 g Hydroxylammoniumchlorid
werden mit Pyridin auf 100 ml aufgefüllt.
Silylierungsreagenz
2,5 ml BSA und 0,8 ml TMCS werden kurz vor der Silylierung gemischt. Da das Silylierungsreagenz
sehr anfällig gegen Wasser und selbst Luftfeuchtigkeit ist, sollte immer nur die für
die anstehende Serie benötigte Menge angesetzt werden.
Durchführung
1 mg des zu untersuchenden Präparates werden in 0,5 ml Oximierungsreagenz im Ultraschallbad
gelöst. Die Lösung wird zur Oximierung für eine halbe Stunde auf 70 °C im Trokkenschrank
erhitzt.
Für die Silylierung gibt man anschließend zu der abgekühlte Lösung 0,33 ml Silylierungsreagenz
(entspricht: 0,25 ml BSA + 0,08 ml TMCS) und erwärmt wieder für eine halbe
Stunde im Trockenschrank auf 70 °C.
Nach dem erneuten Abkühlen gibt man noch 0,25 ml TCTFE hinzu. Die erhaltene Lösung
kann direkt für die Gaschromatographie eingesetzt werden.
7.1.5.2 Charakterisierung der Präparate nach Acetylierung
Chemikalien
• Präparate aus 7.1.2, 7.1.3 und 7.1.4
• Acetanhydrid (Merck, Darmstadt)
• Pyridin, zur Analyse (Merck, Darmstadt)