Dissertationsschrift - Ralf Liedke 1999

7 Arbeitsvorschriften 149
ethanolische Extrakt wird am Rotationsverdampfer bei einer Wasserbadtemperatur von
35 °C auf ca. 10 ml eingeengt.
7.6.2.3 Trennung von Zuckern und Amadori-Verbindungen an der Kationenaustauschersäule
Der eingeengte Extrakt aus 7.6.2.1 und 7.6.2.2 wird durch einen Faltenfilter direkt auf die
Kationenaustauschersäule gegeben; man läßt langsam einziehen und spült noch zweimal
mit je 10 ml Wasser. Danach wäscht man die Säule mit 50 ml Wasser zuckerfrei. Das Eluat
fängt man hierbei in einem Meßkolben (100 ml) auf, den man anschließend mit Wasser bis
zur Marke auffüllt. Zur gaschromatographischen Bestimmung (nach 7.6.3) der Zucker werden
0,2 ml dieser Lösung gefriergetrocknet und direkt derivatisiert. Bei der Bestimmung der
Zucker aus Malzen kann es beim vorangegangenen Ethanolextrakt zu Verlusten an Maltose
kommen [25]. Deswegen werden die Zucker in diesem Fall nicht aus dem Säuleneluat,
sondern direkt aus einem wäßrigen Extrakt bestimmt. Dafür werden 0,5 g zerkleinertes Malz
mit 10 ml Wasser im Ultraschallbad extrahiert. 0,2 ml davon werden direkt gefriergetrocknet
und zur Gaschromatographie eingesetzt.
Anschließend werden die Amadori-Verbindungen mit 140 ml Trichloressigsäure-Lösung
(0,5 mol/l) von der Säule eluiert. Man engt das Eluat auf ca. 50 ml ein und schüttelt zur Entfernung
der Trichloressigsäure siebenmal mit 60 ml Diethylether aus, wobei man die organische
Phase verwirft. Die wäßrige Phase wird am Rotationsverdampfer auf wenige Milliliter
eingeengt. Der so gewonnene Extrakt, der die Amadori-Verbindungen enthält, wird schließlich
gefriergetrocknet und der Rückstand zur gaschromatographischen Bestimmung eingesetzt.
7.6.2.4 Bestimmung der α-Dicarbonylverbindungen als Chinoxaline in Maischen
und Würzen
25,0 ml der zu untersuchenden Maische bzw. Würze werden mit 70 ml Ethanol (96%) versetzt
und zur vollständigen Abscheidung der Polysaccharide über Nacht bei 4°C gelagert.
Man filtriert die Lösung durch einen Faltenfilter ab und wäscht mit 70%igem Ethanol nach.
Der Extrakt wird am Rotationsverdampfer bei einer Wasserbadtemperatur von 60 °C auf ca.
20 ml eingeengt, so daß man das Ethanol vollständig entfernt hat. Man schüttelt die Chinoxaline
zweimal mit 25 ml n-Butanol aus. Die organischen Phasen werden in einem Spitzkolben
gesammelt und anschließend am Rotationsverdampfer zur Trockne eingeengt. Den
Rückstand, der die Chinoxaline neben den zu einem Teil mit extrahierten Zuckern enthält,
nimmt man in 10,0 ml eines Wasser / Methanol-Gemisches (1:1) auf. Ein Aliquot von 1,0 ml
wird zur Entfernung des Methanols am Rotationsverdampfer auf die Hälfte eingeengt und der
wäßrige Rest gefriergetrocknet. Der Rückstand wird direkt zur gaschromatographischen
Bestimmung der Chinoxaline eingesetzt.