Dissertationsschrift - Ralf Liedke 1999

7 Arbeitsvorschriften 137
• Citratpuffer, pH 7,0
nach 7.2.3 jedoch ohne weitere Zusätze
• Modell ohne Puffer, pH 7,0
Wasser wird mit Natronlauge (1 mol/l) auf pH 7,0 gebracht, keine weiteren Zusätze
• Phosphatpuffer (0,1 mol/l), pH 7,0
10,89 g di-Natriumhydrogenphosphat und 5,28 g Kaliumdihydrogenphosphat werden in 1 l
Wasser gelöst und der pH-Wert auf 7,0 eingestellt [112].
7.2.4.1 Ansatz der Kupfer-Verdünnungsreihe
• Ansatz der Kupfer-Stammlösung I:
85,25 mg Kupfer(II)chlorid-Dihydrat werden mit Pufferlösung auf 100 ml aufgefüllt. Diese
Stammlösung hat damit eine Kupferkonzentration von 5,0 mmol/l.
Modell Cu I enthält 100 µl der Stammlösung I auf 1,0 ml. Die anderen Modelle entsprechend
100 µl einer 1:10-Verdünnung der vorangegangenen Kupfer-Standardlösung. Daraus ergeben
sich folgende Kupferkonzentrationen; das Modell II entspricht dem üblichen Kupfergehalt
in den sonst verwendeten Modellen.
Tabelle 11: Konzentrationsreihe in den Modellen mit unterschiedlichen Kupfergehalten
Durchführung
Modell Kupferkonzentration
Cu I 500,0 µmol/l 31,8 mg/l
Cu II 50,0 µmol/l 3,18 mg/l
Cu III 5,0 µmol/l 318,0 µg/l
Cu IV 0,5 µmol/l 31,8 µg/l
Cu V 50,0 nmol/l 3,18 µg/l
Cu VI 5,0 nmol/l 318,0 ng/l
Cu Blind - -
Um die Abhängigkeit der Glucoson-Bildung von der Kupferionen-Konzentration zu ermitteln,
werden Modelle mit einem pH-Wert von 7,0 und unterschiedlich hohen Gehalten an Kupferionen
angesetzt. Die Proben werden für 24 h auf 50°C erhitzt. Wie die anderen Modelle
zeigten, spielt bei diesen niedrigen Temperaturen nur die Glucoson-Bildung eine Rolle, so
daß Konkurrenzreaktionen, die zu den Desoxyosone führen, nicht zu erwarten sind.
Man wiegt 50 mg Fructose-Alanin und 36 mg o-Phenylendiamin ein und löst in jeweils 15 ml
Pufferlösung (Citratpuffer, Phosphatpuffer, ungepuffert). Für jeden Meßpunkt werden jeweils
900 µl dieser Ausgangslösung in einem Sovirelglas mit 100 µl der entsprechenden Kupfer-
Standardlösungen versetzt. Die Konzentrationen an Fructose-Alanin (12 mmol/l) und