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CAPÍTULO X: C.A. GALICIA
Figura 3. Ajuste al modelo lineal mediante métodos de regresión, para el
calibrado del método UV-vis de la segunda derivada para la determinación de
florfenicol disuelto en agua de mar en presencia de pienso.
Estudios in vivo
Técnica analítica
El método analítico escogido para la detección y cuantificación del florfenicol
y de la oxitetraciclina en plasma y en tejido de peces, es la Cromatografía Líquida de
Alta Eficacia, HPLC (High Performance Liquid Chromatography) debido a la precisión,
sensibilidad y eficacia que esta técnica nos otorga. El equipo de cromatografía (Merk-
Hitachi) empleado en el estudio, consta de una bomba modelo L-6200, un inyector
automático AS-4000, un termostato L-5025 para la columna, un detector UV de Red
de Diodos modelo L-4500, conectado a un ordenador COMPAQ Deskpro XE 450
mediante una Interface modelo D-6000. Para el análisis del FF en las muestras de
plasma de los peces se emplean dos columnas de separación, ambas de fase
reversa C18 con partículas de 5 µm de diámetro. En concreto en la parte inicial del
trabajo se utiliza una Lichrospher 100 RP-c18 (125x4 mm) que es sustituida por una
Simetry RP-c18 en la segunda parte. Para proteger la columna se emplea una
precolumna de idénticas características que la columna anteriormente descrita. La
fase móvil empleada en el análisis de las muestras, es una mezcla de 0,05 M de
acetato amónico, pH 7, y acetonitrilo (80:20,V/V). El flujo seleccionado es de 1,3
ml/min, el cual genera una presión de 140 kgf/cm 2 . Todos los disolventes, antes de
inyectarlos en la columna, son filtrados a través de filtros de nylón de un diámetro de
poro de 0,45 µm. El FF es detectado a una longitud de onda de 225 nm.
NUEVOS ANTIBIÓTICOS PARA PATOLOGÍAS BACTERIANAS EN ACUICULTURA MARINA.
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