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2.7 Analisi AFLP
L’analisi AFLP è stata condotta seguendo il protocollo già riportato nel capitolo III paragrafo
2.3. nell’amplificazione sono stati utilizzate dodici combinazioni di primer con 2 basi
selettive, ottenute abbinando 3 primer Mse (MAC, MTT, MGC) e 4 Pst (PCA, PAC, PCT
PCG).
2.8 Analisi statistica
I risultati delle reazioni di amplificazione sono stati separati mediante gel di acrilammide
(6%) analizzato con il Genomix della Beckman Coulter. Dai profili di amplificazione sono
state analizzate le bande per i marcatori AFLP e per gli ISSR da cui si è ottenuta una matrice
dove è stato riportato se il marcatore era uguale al genotipo del genitore paterno o materno.
Per ottenere la distanza genetica fra i marcatori la matrice ottenuta è stata utilizzata nella sua
totalità, per le analisi statistiche mediante il software MapMaker V 3.0 (Lander et al., 1987;
Lincoln et al., 1993) utilizzando un LOD= 3. La distanza di ricombinazione è stata
determinata usando la funzione Kosambi (Kosambi, 1944).
2.9 Campo di interincrocio (libera impollinazione).
Figura 29 Impollinazione entomofila.
In una parcella sperimentale presso l’azienda della Facoltà di Agraria dell’Università della
Tuscia (Viterbo), avente 6 cloni maschiofertili diversi, del tipo Romanesco (Grato 1, Grato 2,
Castellamare, Colosseo, Aurelio e C3) ed un clone maschiosterile (MS 6), e stato lasciato a
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