PhD Thesis_ver3.pdf

103
III. Материали и методи – Методи
14. Получените опитни резултати се обработват чрез статистически методи с помо-
щта на програмата GraphPad Prism 5.0. Най-напред се изчислява фракцията на жизне-
способните/преживелите клетки в отделните експериментални групи спрямо нетрети-
раната контролна група, като съотношение между средните абсорбции на съответните
проби, изразено в проценти:
След това се определят стандартните отклонения на получените резултати. Прави се
анализ за значимостта на различията между отделните групи чрез непараметричния
статистически тест на Mann-Whitney. След нелинеен регресионен анализ се получава
графика на зависимостта концентрация-ефект. Извежда се и зависимостта lg(концен-
трация)-ефект, от която се изчислява IC50-стойността на изследваното вещество спрямо
съответните клетки. Определя се и 95% доверителен интервал на IC50.
В случаите, когато клетките са третирани едновременно с две различни вещества, се
прави оценка на комбинационния ефект по метода на Webb (Webb 1963). Опитно
наблюдаваните стойности за преживяемостта на клетките, третирани с комбинацията
(SFA+B(набл.)), се сравняват с очакваните стойности за преживяемостта на клетките, които
биха били отчетени, ако дадена комбинация се характеризира с адитивен ефект
(SFA+B(оч.)). Тези очаквани стойности се изчисляват по следната формула, където със
SFA и SFB са означени процентните фракции на преживелите клетки след самостоятел-
но третиране с веществото A или B спрямо преживелите клетки в нетретираната конт-
рола:
Стандартното отклонение (S) на очакваните стойности за преживяемостта се
изчислява по формулата:
Като критерий за значимостта на различията между (SFA+B(набл.)) и (SFA+B(оч.)) се при-
ема незастъпването на техните 95% или 99% доверителни интервали – съотв. P < 0,05
или P < 0,01. Ако при P < 0,05 експериментално получената стойност за преживяемост-
та е под 70% от очакваната, комбинационният ефект се квалифицира като потенциращ