PhD Thesis_ver3.pdf

IV. Резултати – Механизъм на действие на изследваните вещества
6 h 14 h
Erufosine, µM 0 5 10 20 40 0 5 10 20 40
Относително ниво на
p-Akt1/2/3
Относително ниво на
Akt1/2/3
Относително ниво на
p-JNK1/2/3 54 kDa
Относително ниво на
p-JNK1/2/3 46 kDa
Относително ниво на
JNK1/2/3 54 kDa
Относително ниво на
JNK1/2/3 46 kDa
Относително ниво на
p-c-Raf
Относително ниво на
p-МЕК1/2
Относително ниво на
p-ЕRК1/2
Относително ниво на
ЕRК1/2
Относително ниво на
p-p90RSK
Относително ниво на
p-MSK1
Относително ниво на
p-STAT3α/β
1,0 0,4 0,5 0,2 0,1 1,0 0,15 0,05 0,02 0
1,0 1,0 1,0 0,6 0,2 1,0 1,1 0,6 0,05 0
1,0 0,9 1,8 3,3 4,0 1,0 0,8 1,5 1,8 0
1,0 1,8 4,5 9,0 13,7 1,0 1,3 9,6 13,3 15,8
1,0 1,0 1,0 0,6 0,3 1,0 1,0 0,7 0,3 0,3
1,0 0,6 0,7 0,6 0,3 1,0 1,6 1,8 2,3 5,2
1,0 3,5 3,3 1,0 0,2 1,0 3,4 1,2 0,01 0
1,0 3,8 5,2 4,8 1,5 1,0 6,5 3,4 0,2 0
1,0 2,1 5,8 21,2 12,6 1,0 2,3 2,5 1,4 2,8
1,0 1,0 0,9 0,6 0,6 1,0 1,0 1,0 0,9 1,0
1,0 1,1 2,2 2,3 0,5 1,0 1,0 0,3 0,05 0
1,0 0,8 0,6 0,4 0,4 1,0 0,7 0,2 0 0
1,0 1,9 2,2 1,8 1,4 1,0 1,1 1,1 0,8 1,0
Таблица IV.3. Въздействие на Erufosine върху нивото и степента на фосфорилиране
(съотв. степента на функционална активност) на ключови сигнални протеини в
миеломни клетки OPM-2. Клетките са третирани с еруфозин в концентрации до 40
µМ за период от 6 или 14 часа, след което са лизирани и са анализирани чрез имуноблот.
Денситометрично определените интензитети на бандовете за изследваните
протеини са разделени на съответните интензитети за контролния протеин β-актин.
Получените съотношения при нетретираните контроли са приети за единица
и спрямо тях са преизчислени останалите.
новява известно повишение в степента на фосфорилиране на JNK под действие на еру-
фозина. Такова повишение не се наблюдава в 14-часовите проби. Прави впечатление,
че клетките RPMI-8226 експресират предимно 54 kDa JNK, но по-нискомолекулните
(46 kDa) форми на JNK са фосфорилирани в по-голяма степен. Еруфозинът повишава
нивото на p-c-Raf (Ser338). Сред 6-часовите проби, този ефект е най-силно изявен в тре-
тираната с 20 µM еруфозин (8,4-кратно повишение), а сред 14-часовите проби – в тре-
тираната с 10 µM еруфозин (8,9-кратно повишение). По подобен начин нараства и ни-
вото на p-MEK (Ser217/221), но максималното повишение в случая е 2,6-кратно (при
третиране с 20 µM еруфозин за 6 часа). В клетките, третирани с 40 µM еруфозин за 14
часа, обаче се наблюдава силен спад в нивото на p-MEK. Вижда се, че в повечето слу-
217