PhD Thesis_ver3.pdf

Сравнително in vitro изследване на нови възможности за фармакологично повлияване на
мултипления миелом
2.5.3. Инхибиране на сигналния път PI3K/Akt
АФХ могат да инхибират сигналния път PI3K/Akt. Те постигат това нарушавайки
локализирането на Akt (известен още като протеин-киназа B) в плазмената мембрана.
Потиска се активирането на Akt, тъй като се възпрепятства фосфорилирането му при
Tyr308 от PDK1 и при Ser473 от комплекса mTOR/Rictor (TORC2) – процеси, които се
извършват в мембраната (Gills and Dennis 2009). Експресирането в клетки на миристи-
лирана форма на Akt, която е конститутивно свързана с мембраната, преодолява инхи-
биращия ефект на Perifosine (Kondapaka, Singh et al. 2003). Засега няма ясен отговор на
въпроса как точно АФХ пречат на локализирането на Akt в мембраната. Според някои
автори това се случва поради намалената продукция на PIP3, който нормално се свързва
с плекстрин-хомоложния домен на Akt. Други данни показват, че АФХ не инхибират
фосфатидилинозитол-3-киназата (PI3K, ензимът превръщащ фосфатидилинозитола в
PIP3), което оставя възможността АФХ пряко да инхибират свързването на PIP3 с плек-
стрин-хомоложния домен на Akt (фиг. I.5) (van Blitterswijk and Verheij 2008). В резултат
на инхибирането на сигналния път PI3K/Akt се повишава експресията на p21 WAF1/Cip1 ,
потиска се циклин-зависимата киназа 2 (CDK2), активира се Rb и клетъчният цикъл
спира. Повлияват се и други регулирани чрез Akt протеини. Така например Akt фосфо-
рилира и инактивира Bad, каспаза-9, както и транскрипционните фактори Forkhead и
CREB; потиска функциите на p53; фосфорилира и активира mTOR и IKK. Интересно е,
че перифозинът може да индуцира разграждане на mTOR по алтернативен механизъм,
чрез протеазомата (Fu, Kim et al. 2009). Това допълнително води до инхибиране на фос-
форилирането на Akt.
2.5.4. Активиране на JNK
Киназата JNK е ключов участник в сигнален път, който по принцип се активира от
различни стресови фактори (възпалителни цитокини, Fas/CD95, ултравиолетова и йони-
зираща радиация, топлинен шок, реактивни кислородни радикали) и може да индуцира
апоптоза. JNK се активира посредством киназите MKK4 и MKK7, а те – посредством
киназите MEKK1 и ASK1. АФХ могат да въздействат върху MEKK1 и ASK1 по различ-
ни механизми и така активират JNK (van Blitterswijk and Verheij 2008). Освен това е из-
вестно, че Akt може да фосфорилира и инактивира ASK1, което показва и възможност-
та JNK да бъде активиран чрез инхибиране на Akt. JNK повишава експресията на c-Jun
56