PhD Thesis_ver3.pdf

Сравнително in vitro изследване на нови възможности за фармакологично повлияване на
мултипления миелом
3.4. Влияние на фибронектин
Беше изследвано влиянието на фибронектина върху цитотоксичната ефективност на
Erufosine спрямо миеломните клетъчни линии U-266, OPM-2 и RPMI-8226. Фибронек-
тинът беше прилаган в крайна концентрация 5 mg/ml, едновременно с еруфозина. По-
лучените резултати (отчетени на 72-ия час) са представени на фиг. IV.96. Вижда се, че
при третираните с фибронектин клетки U-266, кривата, изразяваща зависимостта на
цитотоксичния ефект (като процент преживели клетки) от приложената концентрация
еруфозин, лежи по-високо от съответната крива за нетретираните с фибронектин клет-
ки. Разликата е статистически значима при 6,25, 12,5 и 25 µM Erufosine (P < 0,01), а съ-
що и при 3,13 µM Erufosine (P < 0,05). Отчетената ІС50 на Erufosine за клетъчната линия
U-266 е 16,1 (15,6 - 16,7) µM в присъствие на фибронектин и 12,8 (12,3 - 13,3) µM в от-
съствието му. При клетки OPM-2 приложението на фибронектин води до слабо понижа-
ване на цитотоксичния ефект на еруфозина (P < 0,05 при 1,56, 3,13 и 12,5 µM Erufosine).
ІС50 на Erufosine за тази клетъчна линия е 4,9 (4,7 - 5,2) µM в присъствие на фибронек-
тин и 4,6 (4,4 - 4,7) µM в отсъствието му. При третираните с фибронектин клетки
RPMI-8226, кривата, изразяваща зависимостта на цитотоксичния ефект (като процент
преживели клетки) от приложената концентрация еруфозин, се припокрива със съответ-
ната крива за нетретираните с фибронектин клетки, т.е. в случая фибронектинът не по-
влиява цитотоксичния ефект на еруфозина. ІС50 на Erufosine за клетъчната линия RPMI-
8226 е 6,6 (6,4 - 6,8) µM в присъствие на фибронектин и 6,3 (6,1 - 6,6) µM в отсъствието
му.
3.5. Влияние на MEK1/2
Първоначално бяха изследвани последствията от инхибиране на MEK1/2 върху про-
лиферационната активност на миеломни клетки от трите линии. Клетките бяха трети-
рани за 48 часа с инхибитора U0126 в концентрация 10 µM. Получените резултати са
представени на фиг. IV.97. Наблюдава се цитотоксичен ефект и при трите клетъчни ли-
нии. Преживяемостта на клетките спрямо нетретираната контрола е 79,0%, 80,5% или
89,6%, съответно за клетки U-266, OPM-2 и RPMI-8226.
Бяха изследвани комбинационните цитотоксични ефекти след едновременно трети-
ране на миеломни клетки с U0126 и Erufosine за 48 часа. Получените резултати са пред-
ставени на фиг. IV.98. Вижда се, че при третираните с U0126 клетки U-266, кривата, из-
274