PhD Thesis_ver3.pdf

337
VIII. Приложение I
Goat anti-mouse IgG-HRP – козе антимише IgG антитяло, конюгирано с перо-
ксидаза от хрян; 400 µg/ml (Santa Cruz Biotechnology; кат. № sc-2055; парт. № K2607)
Goat anti-rabbit IgG-HRP – козе антизаешко IgG антитяло, конюгирано с пе-
роксидаза от хрян; 400 µg/ml (Santa Cruz Biotechnology; кат. № sc-2054)
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody – козе антизаешко IgG антитяло, коню-
гирано с пероксидаза от хрян (Cell Signaling Technology; кат. № 7074)
Субединица B на холератоксина, конюгирана с пероксидаза от хрян (CTxB-HRP)
(Sigma-Aldrich; кат. № C3741) – за детекция на ганглиозид GM1. Съхранява се при
+4°C. Преди употреба реактивът беше разтворен в 100 µl вода.
4.8. За визуализиране на комплексите антиген-антитяло
Хемилуминесцентен реактив Western Lightning (PerkinElmer, САЩ; кат. №
NEL101001EA). Реактивът се приготвя непосредствено преди употреба чрез смесването
на равни обеми от два разтвора: разтвор I и разтвор II. Разтвор I съдържа луминол, а
разтвор II – водороден пероксид.
Рентгенови касети
Фотографски плаки Amersham Hyperfilm ECL (GE Healthcare; кат. № 28-9068-36)
Машина и разтвори за проявяване (AGFA, Белгия)
4.9. За отстраняване на антителата от мембраните (стрипиране)
Разтвор за стрипиране със състав:
62,5 mM Трис.HCl, pH 6,8;
2% SDS;
0,7% 2-меркаптоетанол*;
двойно дестилирана вода.
* 2-меркаптоетанолът се прибавя непосредствено преди употреба.
Клатачна машина с термостат
За 500 ml:
Трис.HCl 4,9 g
SDS 10,0 g
2-меркаптоетанол * 3,5 ml
dd H2O до 500 ml