Combo Công phá Lý thuyết môn Sinh Học 3 khối 10, 11, 12 năm 2019

nhận bằng nhiều cách khác nhau.
1. Thành phần tham gia
Tế bào cho là những tế bào chứa gen cần chuyển (vi khuẩn, thực vật, động vật).
Tế bào nhận: vi khuẩn, tế bào thực vật (tế bào chồi, mầm), tế bào động vật
(như tế bào trứng, phôi).
Enzyme gồm enzym cắt giới hạn và enzyme nối.
Enzyme cắt giới hạn (restrictaza): cắt hai mạch đơn của phân tử ADN ở
những vị trí nucleotid xác định.
Enzyme nối (ligaza): tạo liên kết phosphodieste làm liền mạch ADN, tạo
ADN tái tổ hợp.
Thể truyền (véctơ chuyển gen) là phân tử ADN có khả năng tự nhân đôi,
tồn tại độc lập trong tế bào và mang gen từ tế bào này sang tế bào khác,
thể truyền có thể là các plasmid, virut hoặc một số NST nhân tạo như ở
nấm men.
ADN tái tổ hợp là một phân tử ADN nhỏ được lắp ráp từ các đoạn ADN từ các phân tử khác nhau (thể
truyền và gen cần chuyển).
2. Quy trình tạo ADN tái tổ hợp
a. Tạo ADN tái tổ hợp
- Tách chiết thể truyền và gen cần chuyển ra khỏi tế bào.
- Xử lí bằng một loại enzim giới hạn (restrictaza) để tạo ra cùng 1 loại đầu dính.
- Dùng enzim nối để gắn chúng tạo ADN tái tổ hợp.
b. Đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận
- Dùng muối CaCl 2 hoặc xung điện cao áp làm dãn màng sinh chất của tế bào để ADN tái tổ hợp dễ
dàng đi qua màng.
c. Phân lập dòng tế bào chứa ADN tái tổ hợp
- Để nhận biết được các tế bào vi khuẩn nào nhận được ADN tái tổ hợp thì các nhà khoa học thường sử
dụng thể truyền là các gen đánh dấu chuẩn hoặc các gen đánh dấu nhờ đó ta có thể dễ dàng nhận biết
được sự có mặt của các ADN tái tổ hợp trong tế bào.
- Bằng các kỹ thuật nhất định nhận biết được sản phẩm đánh dấu.
Trang 5